固定材料的制備
用于電子顯微鏡術(shù)的植物材料的制備比動物容易,因為
細(xì)胞從機體上取下不會迅速死去。但一個細(xì)胞內(nèi)個別的細(xì)胞
器可能對損傷刺激產(chǎn)生強烈反應(yīng),故損傷要保持在最低程度。
要記住的主要規(guī)則是固定液浸透不到組織的很深處,所以要
固定的組織必須是薄片形狀,或者最好是很小的立方塊。
把小塊的葉片、莖等直接置于固定液內(nèi),細(xì)胞的表面層會
受到機械損傷,以后必須去掉,而每一小塊或小片的內(nèi)部將會
適當(dāng)?shù)毓潭ā<偃缣駝t里面部分固定很差,在脫水過程中
將表現(xiàn)出來,切成條狀或片狀對于必須保持特殊的方向時是
有用的。
單細(xì)胞藻類、細(xì)菌和其它細(xì)小的懸浮材料可通過離心把
它們沉淀成松散的小球,然后輕輕地把它們懸浮在固定液內(nèi)。
固定以后把懸浮液離心,把沉淀小球再懸浮到少量的經(jīng)加溫
的2%瓊脂里,然后在載玻片上滴成小滴,如果量比較大,則
在培養(yǎng)皿中鋪成薄層。凝固以后,把瓊脂切成小塊,這樣便可
把它作為組織塊進(jìn)行脫水和包埋。
醛固定液
甲醛是醛固定液中最早應(yīng)用的,由于包埋在甲基丙稀酸
酯中時引起組織損傷,所以開始是失敗的;最近用環(huán)氧樹脂作
包埋介質(zhì)解決了這些問題。
一些植物材料具有厚的壁,用鋨酸保存得不好,因為鋨酸
固定液不能適當(dāng)?shù)亟?;先用甲醛固定接著用鋨酸固定常常
是成功的。醛類固定液和鋨酸不同,它沒有破壞酶活性的效
應(yīng),可以在切片上進(jìn)行組織化學(xué)研究。如要進(jìn)行組織化學(xué)研
究,則不能將組織用鋨酸作后固定,醛類不能用巴比妥緩沖液,
因為它們互相反應(yīng),其它任何緩沖液都合適。
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