培養(yǎng)液中細胞葡萄糖代謝實驗觀察倒置顯微鏡

  增加了培養(yǎng)液中碳酸氫鈉弱解離作用從而產(chǎn)生過剩的H+降低培
養(yǎng)液pH。因此在密閉培養(yǎng)時需要大的上方空間，其體積要比培養(yǎng)液
大10倍，這個體積對供給足夠的氧氣也是需要的。這種一般的上方
空間對于大規(guī)模培養(yǎng)或連續(xù)流動空氣的開放系統(tǒng)是不可能的，故后
者要求通過1個濾器供氣并通過另1個濾器抽氣。

  細胞進行葡萄糖代謝其結(jié)果是累積丙酮酸和乳酸鹽。葡萄糖代
謝比細胞要求要快，因此培養(yǎng)液中理想的葡萄糖濃度是2g幾以下，
在培養(yǎng)中補充葡萄糖比一開始增加葡萄糖的濃度更好一些，用半乳
糖或果糖代替葡萄糖是一種改良，因可明顯減少乳酸的形成，但也
同時帶來生長率緩慢的結(jié)果。這些防止非生理學(xué)的pH作用對小量培
養(yǎng)是成功的。當培養(yǎng)規(guī)模擴大時，培養(yǎng)上方空間及培養(yǎng)表面面積與
培養(yǎng)液容量的比例將減少。同時，為了增加細胞貼壁的表面面積及
增加單位體積的細胞密度開發(fā)了很多系統(tǒng)。

  pH控制系統(tǒng)的基本原理是一個經(jīng)高壓滅菌的pH檢測探頭，將信
號輸入pH控制器，然后換成數(shù)字或類似的pH顯示。這是一種pH監(jiān)測
系統(tǒng)。要求按規(guī)定控制pH值的高低，pH不能超出這個范圍。pH值調(diào)
整板上的這兩個高或低規(guī)定點接轉(zhuǎn)到1個能起動泵或螺線管活塞的
中繼器上，這些裝置將加入酸或堿使培養(yǎng)系統(tǒng)pH調(diào)整至規(guī)定的范圍
內(nèi)。一旦培養(yǎng)液與上方空間相平衡后，它是很少見到pH上升到規(guī)定
點之上，因而加入酸是忽略不計的，如果加入堿則推薦使用碳酸氫
鈉(5．5％)、氫氧化鈉(o．2mol幾)只能用在快速攪拌率的培養(yǎng)系
統(tǒng)，因為局部濃堿在被稀釋之前可損害細胞。

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