蓋玻片樹膠封固技巧-樣品切片觀察顯微鏡
封固的注意事項(xiàng)
(1)若組織切片染色后的逐步脫水過程不完全,可造成切片在光
鏡下觀察如同蒙上了一層薄霧,影響標(biāo)本細(xì)微結(jié)構(gòu)的觀察,原因是
標(biāo)本內(nèi)含有少量水分,水又不與二甲苯相溶所致。糾正方法:將切
片浸于二甲苯中并脫去蓋玻片,將切片逐步退回到95%乙醇中再重
新進(jìn)行新一輪的乙醇脫水、二甲苯透明及樹膠封固。
(2)二甲苯是很容易揮發(fā)的有機(jī)溶劑,因此封固時(shí)標(biāo)本表面的
二甲苯不能揮發(fā)干,否則光鏡下見到的組織中,尤其是在細(xì)胞核上
,有類似于色素樣的黑色斑點(diǎn),原因是標(biāo)本間隙中存有空氣所致。
糾正方法同上。
(3)封固時(shí),每張標(biāo)本滴入樹膠的量要合適,滴加過多的樹膠
,可造成樹膠外溢在蓋玻片四周,影響標(biāo)本的外觀;滴入樹膠量過
少,可造成蓋玻片內(nèi)的樹膠回縮,暴露組織,這種現(xiàn)象稱為漏膠,
同樣會(huì)影響光鏡下的觀察效果。另外,每次滴加樹膠時(shí)最好不要用
玻璃棒攪動(dòng)樹膠,否則會(huì)在其內(nèi)產(chǎn)生氣泡,而氣泡會(huì)隨著封固呈現(xiàn)
在組織內(nèi),影響組織切片觀察。
(4)所選用的蓋玻片大小要適宜,過小的蓋玻片蓋不住標(biāo)本,
可使暴露于蓋玻片外或邊緣的組織出現(xiàn)褪色的現(xiàn)象。蓋玻片以覆蓋
標(biāo)本且四周留有2mm空白邊為宜。
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