在人維生素D3(VD3)檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存??捎米魅司S生素D3(VD3)檢測試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,人維生素D3(VD3)檢測試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的zui終體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。
假如您的人維生素D3(VD3)檢測試劑盒不幸地碰到了高背景,那么也無需太擔(dān)心,依次查看人維生素D3(VD3)檢測試劑盒系統(tǒng)中的組分,并排除可能存在的題目。記住,非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。不外,它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會(huì)降低特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。目前主要有兩種類型的封鎖液:蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾,那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封鎖液。
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