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在人維生素D3(VD3)檢測試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存?？捎米魅司S生素D3(VD3)檢測試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛，體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份，人維生素D3(VD3)檢測試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物)；
(3)酶的底物；
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中)；
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；
(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；
(7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的zui終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。
假如您的人維生素D3(VD3)檢測試劑盒不幸地碰到了高背景，那么也無需太擔(dān)心，依次查看人維生素D3(VD3)檢測試劑盒系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的題目。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。不外，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封鎖液。
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