全面、細(xì)致的介紹如何制作薄層層析硅膠板 在做分離分析鑒定時(shí),會使用到薄層層析鑒定技術(shù),而薄層層析硅膠板就是這其中的一個(gè)重要工具。在實(shí)驗(yàn)室,我們通常需要自己做硅膠板。全面、細(xì)致的介紹如何制作薄層層析硅膠板。 初步溶解CMC鈉鹽:先取1000ml水加熱至沸騰,再稱取8gCMC纖維素鈉鹽800~1200于一大錐形瓶中,將一部分沸水緩慢加入到錐形瓶中并且不斷用玻璃棒攪拌,待CMCNa鹽大部分溶解,再將所有水加入其中。(一般書上用0.5%的CMCNa,但是經(jīng)過我們實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證0.8%的量,噴硫酸 乙醇顯色劑的實(shí)驗(yàn)效果會更好) 恒溫再次溶解:把上步的水溶液放到60~70℃的恒溫水浴鍋中放置2~3個(gè)小時(shí),期間要不斷攪拌。至水溶液中CMCNa全部溶解為宜。若zui后水溶液體積小于1000ml,則需要補(bǔ)加熱水至1000ml。 離心:將上步水溶液用離心機(jī)4000轉(zhuǎn)、15min離心,然后取上清液800ml即可。此步也可以用抽濾代替,但是抽濾操作十分麻煩,而且非常容易發(fā)生堵塞,效率低下。 薄層層析硅膠板溶解硅膠:稱取270g薄層層析硅膠于豆?jié){機(jī)中,然后將800ml水溶液加入其中,注意邊加邊攪拌。啟動(dòng)豆?jié){機(jī)將溶液混合均勻。然后取出溶液用超聲波超聲一段時(shí)間,至溶液中無氣泡為止。(一般硅膠與水溶液的比例為1:3) 薄層層析硅膠板涂布玻璃板:先將需要涂布的玻璃板在涂布器上擺好,然后用涂布器涂布把氣泡排盡的溶液涂布到玻璃板上。操作時(shí)需要注意要一次性涂布,不能重復(fù)涂布! 晾干與烘干(活化):涂布完成之后就將玻璃板放置干凈位置晾干,一般一夜時(shí)間就可以了。把晾干后的板子放到110℃的烘箱中活化30min(從110℃開始計(jì)時(shí))。烘干時(shí)需要把變色硅膠一同放入。完成之后,與變色硅膠一同放入干燥器中存放。