一、色譜 質譜分析方法 典型的二惡英類化合物分析過程包括樣品采集、提取、純化和富集、氣相色譜 質譜 (GC MS) 分析和數(shù)據(jù)處理。國內的主要分析方法是以美國 EPA1613 方法及日本工業(yè)標準 JISK0311 1999 為基礎相繼建立起來的。自中國環(huán)保行業(yè)標準 HJ/T77 實施后，主要依據(jù)此標準進行二惡英類物質分析研究，但各實驗室也會在各實驗條件下，對不同相樣品的分析過程進行優(yōu)化，實現(xiàn)效率和檢測水平的提高。 國家標準規(guī)定的方法是同位素稀釋高分辨氣相色譜 高分辨質譜法 (HRGC HRMS)。用色譜法檢測二惡英類化合物首先需進行樣本中待分析物的提取和純化，這是由于分析物在樣本中含量低 (ppt級)，超痕量分析很容易受基質中其它成分的影響。然后用色譜柱分離，并與檢測器聯(lián)用進行定性、定量。由于質譜具有高精度的分析檢測能力，目前多選擇與質譜檢測器聯(lián)用。 典型的二惡英類分析過程如下： 1.樣品采集及富集 國家環(huán)境分析測試中心、廣州地球化學研究所及中國科學院生態(tài)環(huán)境研究中心等單位已有研究對我國焚燒設施產(chǎn)生的飛灰、大氣環(huán)境樣品中的二惡英類物質進行分析，采樣方法主要是用大流量采樣器濾膜收集、智能大流量TSP采樣器及玻璃纖維膜(GFF) 一吸附載體(聚亞胺脂泡沫， PUF)系統(tǒng)采集方法等。 2.二惡英提取 提取的目的在于使二惡英與原基質分離，而萃取進入用于抽提的溶劑中。該步驟對于檢測的重現(xiàn)性至關重要，主要是溶劑的選擇和提取方法的選擇，且不同的樣本需采用不同的提取方法。 對于飛灰、土壤、灰塵、沉積物等樣品，采用的溶劑是甲苯、二氯甲烷、二氯甲烷和丙酮混合液(1:1體積比)等。對生物樣本一般是在冰凍后與無水硫酸鈉共同研磨去除水分，然后再采用合適的溶劑提取，采用的溶劑主要是1:1二氯甲烷：己烷(分析純)、1:1的二氯甲烷：正己烷、甲苯、丙酮等。血樣提取前常添加乙醇和硫酸銨飽和溶液，然后再抽提。奶樣則先用甲酸處理。對空氣樣本在采樣后，用以下有機溶劑進行洗脫抽提，主要為：丙酮、甲苯、二氯甲烷。 目前用于二惡英樣品提取的方法主要是索式提取法。近年來出現(xiàn)了一些替代的提取新技術，如超聲萃取法、超臨界流體萃取(SFE)、加速溶劑萃取(ASE)、微波提取等。這些新方法縮短了提取時間，大大減少了有毒有機溶劑的使用量。隨著實驗室水平的不斷提前，ASE技術將取代索式提取法用于對土壤、沉積物以及生物組織的研究分析。 3.二惡英純化 用于純化的方法主要有：液一液分配、濃硫酸磺化、堿解、氧化、柱層析(包括凝膠色譜和液相色譜)。其中，采用幾根層析柱串聯(lián)或多種填料填充柱層析法是較為通用的方法，當前主要采用二種方法相結合的方式，即采用幾根多種填料的層析柱對樣品進行純化預處理。常用的吸附劑有硅酸鹽類吸附劑、佛羅里土、氧化鋁、活性炭等。 當前用于二惡英純化的技術有二種，即手工和自動純化技術。手工純化技術主要是采用幾根填充有不同吸附劑的層析柱對環(huán)境樣品進行純化。國內普遍使用的是國家標準中采用的技術，由三根層析柱所組成，即多層酸化硅膠柱、氧化鋁和佛羅里土柱，用不同配比的正己烷和二氯甲烷溶劑進行洗脫，收集洗脫液，濃縮分析。而國外開發(fā)的自動純化技術也開始進入我國實驗室，主要以PGC-PLC、FMS PowerPrep系統(tǒng)發(fā)展較為成熟[6]。 4.二惡英檢測 二惡英類化合物的測定方法有：液相色譜、薄層色譜和氣相色譜，其中氣相色譜技術遠優(yōu)于另外兩者。由于檢測限的原因，目前主要使用的檢測器是質譜儀，電子俘獲檢測器也有一定的應用。使用的質譜儀電離方式主要使用EI。目前串聯(lián)質譜也得到了應用，它與高分辨率質譜儀比較，有更好的選擇性。大量研究表明，分辨氣相色譜一高分辨質譜法在我國的運用水平已經(jīng)相對成熟。 5.二惡英定性與定量 二惡英類化合物的定性可根據(jù)與標準物質保留時間比較。一種方法是在相同條件下，標準物質與待測物質分別進樣比較保留時間；另一種方法是標準物質和待測物質共同進樣，根據(jù)峰高的增加而定性。目前依靠質譜定性是使用越來越多的方法。二惡英的定量采用TEQ定量法。目前較多的是以同位素為內標來定量，以同位素為內標定量準確，可對分析各步進行評價和控制，進行質量控制。 二、其它方法 二惡英生物測試法有EROD(7一乙氧基一異吩一嗯唑酮一脫乙基酶)細胞培養(yǎng)法、螢光素酶方法、酶免疫方法 (Enzyme Immuno Assay，EIA) 和熒光免疫法 (DELFIA)等，通過對從受體活化程度的測定來間接表達二惡英的TEQ。