你有沒(méi)有從抗體供應(yīng)商那里訂購(gòu)過(guò)抗體？ 你遇到過(guò)抗體特異性，選擇性和重復(fù)性出問(wèn)題嗎？ 你是否曾將抗體退回給供應(yīng)商，卻收到另一份劣質(zhì)產(chǎn)品嗎？ 如果你對(duì)上述問(wèn)題的回答是肯定的，那么你也遭受過(guò) 壞 抗體的毒害。

 

        據(jù)估計(jì)，所有購(gòu)買(mǎi)的抗體中約有50％是 壞的 ，僅在美國(guó)就浪費(fèi)了約3.5億美元。 研究人員可以使用的僅供研究（RUO）使用的抗體超過(guò)400萬(wàn)種，因此記住兩件事是重要的：選擇好的廠家；盡可能在實(shí)驗(yàn)室做交叉驗(yàn)證。 在本文中，我們討論的就是如何驗(yàn)證購(gòu)買(mǎi)抗體的參數(shù)（即選擇性，特異性結(jié)合/解離速率，平衡常數(shù)），以確保你獲得高質(zhì)量抗體，從而節(jié)省你的時(shí)間和金錢(qián)。

 

三種類(lèi)型的抗體

         在抗體領(lǐng)域，有三大類(lèi)抗體：多克隆，單克隆和重組抗體。多克隆和單克隆抗體由免疫系統(tǒng)中的記憶B細(xì)胞產(chǎn)生，其分泌抗體應(yīng)對(duì)外來(lái)抗原。多克隆抗體具有識(shí)別和結(jié)合相同抗原上的不同表位的能力，而單克隆抗體識(shí)別并結(jié)合抗原上的單個(gè)表位。這些抗體類(lèi)別之間的主要區(qū)別在于它們的特異性：?jiǎn)慰寺】贵w是高度特異性的，而多克隆抗體更可能發(fā)生交叉反應(yīng)，從而降低特異性。值得注意的是，重組抗體（即通過(guò)DNA重組，表達(dá)，純化等在體外產(chǎn)生）表現(xiàn)出與單克隆抗體相似的方式，但具有許多生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)，包括快速生產(chǎn)，更快的周轉(zhuǎn)時(shí)間和不需要宿主動(dòng)物。理論上，重組抗體技術(shù)將成為主要的抗體生產(chǎn)方法（Bradbury，A.，＆Pl ckthun，2015）。

 

        雖然許多抗體生產(chǎn)商和抗體分銷(xiāo)商提供了分析證書(shū)（CoA），Western blot和/或ELISA數(shù)據(jù)，但有些公司不提供此信息，因此保持警惕，成為聰明的消費(fèi)者和明智地選擇抗體是非常重要的。此外，許多使用Western blot或ELISA等技術(shù)驗(yàn)證抗體的生產(chǎn)商就聲稱(chēng)抗體適用于多種應(yīng)用（如IHC或流式），但沒(méi)有支持性文件；如此便出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室抗體質(zhì)量難保證的危機(jī)。驗(yàn)證購(gòu)買(mǎi)抗體的參數(shù)，如選擇性，特異性，序列數(shù)據(jù)和結(jié)合/解離率以及平衡常數(shù)，可以讓生產(chǎn)者承擔(dān)其責(zé)任，并確保你獲得高質(zhì)量抗體做研究。

結(jié)合常數(shù)及表面等離子體共振技術(shù)檢測(cè)的重要性
 

 

        于2016年發(fā)表在Journaltical Analytical Chemistry Insights上的論文中，作者指出，由于抗體結(jié)合常數(shù)是靜態(tài)特性，并且只有一小部分抗體在說(shuō)明書(shū)會(huì)加上親和力數(shù)據(jù)， 遺憾的是，很少對(duì)抗體及其抗原進(jìn)行親和常數(shù)的測(cè)定 （Weller，2016）。在該文章中，作者認(rèn)為最受歡迎的表征結(jié)合常數(shù)和驗(yàn)證抗體質(zhì)量的方法是表面等離子體共振（SPR）。還有其他可用于檢測(cè)結(jié)合常數(shù)技術(shù)，但不幸的是，這些技術(shù)通常使用大量樣本，需要標(biāo)記，不能提供足夠的信息和/或需要大量的費(fèi)用。而表面等離子體共振（SPR）可獲得抗體完整的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，已成為幾十年來(lái)獲得定量結(jié)合動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)的金標(biāo)準(zhǔn)。
 

Nicoya的OpenSPR 采用創(chuàng)新LSPR技術(shù)，操作簡(jiǎn)單，出結(jié)果速度快且低維護(hù)成本及 低技術(shù)門(mén)檻 ，是下一代SPR解決方案技術(shù)，自2015年上市，全球已突破450臺(tái)的銷(xiāo)量，被數(shù)百名研究人員使用并發(fā)表文獻(xiàn)。OpenSPR實(shí)現(xiàn)了在你自己實(shí)驗(yàn)室工作臺(tái)上使用SPR技術(shù)， 可以快速高效的獲得高質(zhì)量數(shù)據(jù)用于發(fā)表文章。
 

 

SPR不僅對(duì)發(fā)表文章是必要的，而且對(duì)于許多醫(yī)學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的進(jìn)步是必要的，如下圖可以看到的那樣，依賴(lài)于SPR數(shù)據(jù)的文章成顯著增加趨勢(shì)，足以顯示SPR技術(shù)的重要性。

OpenSPR分子互作在抗體檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)
 

多參數(shù)檢測(cè)---Ka、Kd、KD、EC50、蛋白濃度測(cè)定
創(chuàng)新LSPR技術(shù)--- 檢測(cè)不受溫度、緩沖液折射率影響
易操作---1-2小時(shí)快速掌握
寬范圍檢測(cè)---pM-mM
 低成本--- 實(shí)時(shí)無(wú)標(biāo)記、芯片可再生