血液制品是全球人類臨床使用和必備的一線用藥，其品種的多樣性和質(zhì)量的高低會直接影響醫(yī)療救助水平。此前有報道稱截至2015年，我國由于存在年投漿量少、分離技術(shù)起步晚、研發(fā)力度不足等原因，導致血液制品僅能生產(chǎn)近10個品種，遠少于國外發(fā)達國家的28個品種，而我國目前需求量最大的白蛋白、靜脈注射用免疫球蛋白、凝血因子Ⅷ、 -1蛋白酶抑制劑（API）、纖維蛋白原和抗凝血酶Ⅲ這6個品種中，凝血因子Ⅷ和API此前對國外進口的依賴程度仍非常高。因此，我國血液制品行業(yè)一直以來都面臨著產(chǎn)品品種偏少、產(chǎn)量低、血漿利用率低等問題。

對標國際，我們離CSL還有多遠？

CSL公司是全球最大的血液制品公司，總部位于澳大利亞，是全球血液制品巨頭，其營收占全球血液制品行業(yè)的20%，在過去幾十年里，因治療和預防用血液制品的大量研制與應(yīng)用，使原本無法治愈和控制的疾病獲得了有效遏制，因此世界各國對其品種和工藝進行了深入的研發(fā)，如果我們按照血液制品不同作用將其分為人血白蛋白、免疫球蛋白類、凝血因子類、特殊蛋白及微量蛋白和纖維蛋白粘合劑五大類的話，國際和國內(nèi)的市場占有率數(shù)據(jù)情況見表1，從中可以明顯看出，各類品種的市場占有率迥異，然而造成這種現(xiàn)象的原因除了市場供需因素外，還有一個重要的因素就是取決于分離純化技術(shù)。

表1 國際與國內(nèi)市場五類血液制品市場占有率

*資料來源：《中國輸血雜志：世界血漿蛋白制品的市場與前景》
事實上，在血液制品方面，放眼全球除了美國能夠?qū)崿F(xiàn)本國的供應(yīng)，其他國家都或多或少需要進口，并且因為美國采漿量占全球采漿量的比重高達70%左右，半數(shù)可滿足本國需求，半數(shù)可供出口，所以全球血制品價格體系基本受美國市場決定。盡管我們與國外差距甚大，但同時也意味著我們的市場潛力更大，有人甚至直言這就是一個幾乎看不到天花板的細分行業(yè)，并且早在2001年我國政府為了遏制艾滋病通過血液傳染，對血液制品公司實行了牌照管理，不再審批相關(guān)許可牌照，這就進一步造成了牌照的稀缺性，意味著在血液制品行業(yè)就那么幾個玩家。
 

表2 國內(nèi)血液制品企業(yè)產(chǎn)品線情況

*資料來源：中國產(chǎn)業(yè)信息網(wǎng)
 

層析技術(shù)助推血液制品行業(yè)高效安全發(fā)展

隨著分離工藝的發(fā)展，層析技術(shù)已越來越多地應(yīng)用到血漿蛋白的分離和提純中，其中應(yīng)用最廣泛的是離子交換介質(zhì)和親和層析介質(zhì)。親和介質(zhì)是建立在目標蛋白與固定化配基之間特異性、可逆相互作用基礎(chǔ)上的蛋白分離技術(shù)，由于對目的蛋白具有高選擇性和高收率等特點，親和介質(zhì)在病毒去除上也有很好的潛力。

從多年實踐來看，將層析技術(shù)應(yīng)用于血液制品的分離純化以來，我們能夠從根本上改變原有技術(shù)分離時間長、步驟繁瑣、分離效果差、產(chǎn)品種類少、自動化程度低等缺點，有效提高了原料血漿的利用率及使用安全性，豐富了產(chǎn)品種類。從血漿蛋白如白蛋白類的實際純化情況來看，陰離子交換層析在血漿蛋白純化工藝中應(yīng)用廣泛，納微的離子交換層析介質(zhì)如UniDEAE和UniGel-80Q等就很適宜這方面的純化，如結(jié)合低溫乙醇法，在丙種球蛋白純化后期用陰離子交換介質(zhì)（UniDEAE或UniGel-80Q等）吸附二聚體等雜質(zhì)提高純度；白蛋白純化使用UniGel-80Q陰離子交換吸附PKA、微量IgG和聚體等；凝血因子Ⅷ純化用UniGel-80Q可以增加載量和收率。

表3 血液制品層析純化應(yīng)用情況

*資料來源：《微生物學免疫學進展》
 

納微層析介質(zhì)在血液制品純化案例簡介
 

在血液制品的實際分離純化中，總液體體積受以下因素影響：上樣、平衡、洗脫、再生的流速；分離成分的數(shù)目；每一步緩沖液的選擇會影響分離的各個成分的收率和純度；兩個成分峰間距（會對產(chǎn)出的成分的純度和活性有影響）；柱床高度等。因此，在最后放大生產(chǎn)規(guī)模時，綜合考慮緩沖液體積、產(chǎn)率、純度，來設(shè)計柱高、直徑和洗脫流速等均是必須考慮的工藝因素，尤其是柱高和流速更加需做進一步的研究。

我們認為，增加柱床高度有利于提高工藝的耐用性，因為循環(huán)時間增加有利于降低因系統(tǒng)中閥門和管道等引起的死腔體積所帶來的交叉污染的風險。另外因為層析柱的混合區(qū)將在工藝放大中發(fā)生改變（提高混合區(qū)的比例），而在50cm柱高下，柱下部的混合區(qū)域相對于總的擴張床高度的比例會減少，故會顯著降低洗脫模式改變引起的風險。顯而易見的是，相對于傳統(tǒng) 軟膠 基質(zhì)的層析介質(zhì)而言，納微研發(fā)生產(chǎn)的新型 硬膠 基質(zhì)層析介質(zhì)在可裝填更高柱高、更大操作壓力和線性流速、更高動態(tài)結(jié)合載量等諸多方面擁有著無可比擬的優(yōu)勢。

表4 納微科技單分散層析介質(zhì)血液制品純化推薦

*欲知更多應(yīng)用案例信息，歡迎直接聯(lián)系我們。
 

納微UniGel-80Q純化靜丙工藝

 

納微UniGel-80Q純化凝血因子Ⅸ工藝

樣品：血漿離心上清,經(jīng)過A50 DEAE純化,50ml,20mg/ml總蛋白

層析柱：Tricorn 10/10,UniGel 80DEAE 10ml

流速：3ml/min

Buffer A：20mM  檸檬酸， pH 7.0

Buffer B：1M NaCl in Buffer A

洗脫：0-100% B，25CV

CIP：0.5M NaOH，2CV

收集:4管共60ml

回收率:88%