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孢子不易被染色許提升染色通透-顯微鏡高倍油鏡觀察
內(nèi)孢子染色(Endospore staining)
一、目的：利用鑒別染色技術(shù)，將產(chǎn)生內(nèi)孢子之細(xì)菌細(xì)胞及內(nèi)孢子或游離孢子予以染色區(qū)別。
細(xì)菌細(xì)胞(繁殖體)→內(nèi)孢子(endospore 綠色)→游離孢子(free spore)

二、原理：孢子不易被染色，透過(guò)加熱(80℃)，提升染色通透性，無(wú)菌體細(xì)胞可被水脫色，
再利用番紅覆染，使細(xì)菌細(xì)胞呈紅色，內(nèi)孢子呈綠色。
三、材料： 
1.顯微鏡  2.拭鏡紙 3.酒精燈  4.接種環(huán) 5.染色盤  6.載玻片 7.蒸餾水
8.95%酒精 9.洋杉油  10.二甲苯 11.水浴槽  12.玻片夾 13.鑷子 
14.內(nèi)孢子染料：○1孔雀綠(初染劑) ○2番紅染劑
15.菌種：  ○1Escherichia coli (E.coli)大腸桿菌  ○2Bacillus subtilis 枯草桿菌
二、方法：
1. slide 洗凈烘干備用  2. 取1 loop 菌液于slide 涂開(kāi)
3. 烘干固定  4. 加初染劑孔雀綠覆蓋菌膜
5. 80℃水浴加熱5~6min(初染劑不可干掉)
6. 放冷，背面水洗  7. 加番紅染劑30sec
8. 背面水洗  9. 拭干，顯微鏡高倍油鏡觀察  10. 畫圖并紀(jì)錄之