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霉菌、細(xì)菌微觀結(jié)構(gòu)觀察適合實(shí)驗(yàn)高倍率圖像生物顯微鏡
生物性污染,依據(jù)偵測(cè)難易度分為兩種:一為易偵測(cè)的霉菌、細(xì)菌及酵母菌,
另一種為較難偵測(cè)的病毒,原生動(dòng)物,昆蟲,霉?jié){菌及其它細(xì)胞株。
霉?jié){菌的污染可影響細(xì)胞的功能、生長(zhǎng)、代謝、外形、貼附、細(xì)胞膜、病毒的增殖及產(chǎn)量、干擾素的制造及產(chǎn)量等,
也會(huì)引起染色體的異常及損害,因此使用可能遭受霉?jié){菌污染的細(xì)胞所得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),
其可性度是受到高度質(zhì)疑的。
什么樣的特性造成霉?jié){菌這么容易污染?
第一霉?jié){菌是已知最小自我復(fù)制的生物體,只有0.3~0.8 μm。
第二它們?nèi)狈?xì)胞壁。
第三他們對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境非常挑剔,因?yàn)樗麄兊男◇w積又缺乏細(xì)胞壁的特性,造成在細(xì)胞培養(yǎng)中有很高的含量卻又難以
查覺(107~109 colony forming units/mL),培養(yǎng)液不會(huì)有細(xì)菌污染般的混濁,也沒有pH值的變化,
在顯微鏡下觀察也看不到他們的存在,又因?yàn)樗麄冃∏也痪呒?xì)胞壁,也無法用膜將之過濾。
細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境對(duì)它們來說是個(gè)絕佳的好地方。就因?yàn)檫@三個(gè)特性使得霉?jié){菌成為最嚴(yán)重又廣泛且具破壞性的污染源。
檢測(cè)霉?jié){菌的方法
有兩種檢測(cè)方法,一是直接在培養(yǎng)基中培養(yǎng),另一種是間接的利用霉?jié){菌的特性來檢測(cè),
直接培養(yǎng)方式是最靈敏和最有效的方式,但卻最為困難和最耗費(fèi)時(shí)間的,花費(fèi)高甚至超過整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的過程。
間接的方式則有以PCR方式的套組、DNA染色方式、放射能照相方式(autoradiography)、ELISA、
抗體熒光染色、特殊生化分析法,不僅較直接培養(yǎng)方式快且都有商業(yè)化的產(chǎn)品,也能測(cè)到一些因較困難偵測(cè)的菌株