溶解性、鹽溶及鹽析

一個(gè)最常用的最古老的純化蛋白質(zhì)的方法是根據(jù)蛋白質(zhì)在不同離子
強(qiáng)度的溶液中溶解度的不同來分離，在溶液被濃縮時(shí)，許多蛋白質(zhì)的溶
解度不同程度的降低從而沉淀，而另外的蛋白質(zhì)依然溶解。這樣不同的
蛋白質(zhì)由于溶解度的不同就可以在離心的時(shí)候被沉降并被分離。通過溶
解度的不同來分離蛋白質(zhì)是純化中經(jīng)常用到的一個(gè)步驟。

在水溶液中，蛋白質(zhì)溶解度的差別很大。膜蛋白在水溶液中是不溶
解的，許多結(jié)構(gòu)蛋白如膠原質(zhì)本身在常規(guī)的物理環(huán)境下也不溶于水。

  離心

離心是為了分離不同質(zhì)量的分子。嚴(yán)格地說，這種方法不是完全精
確的，因?yàn)殡x心還依賴于其他因素，如分子形狀、溫度以及溶解度。重
的分子比輕的分子沉降快，這是由實(shí)驗(yàn)證明的——將水和沙子的混合物
放人容器中觀察沙子沉到容器底部的時(shí)間。這也是我們每天都能見到的
現(xiàn)象：重的物體由于地球引力而降落。然而仔細(xì)觀察可以發(fā)現(xiàn)小的顆粒
仍然溶解在溶劑中。小分子如蛋白質(zhì)由于布朗運(yùn)動使它們的浮力與引力
相抵消了。

在細(xì)胞生物學(xué)中，分級分離過程是非常重要的，被廣泛運(yùn)用于純化
細(xì)胞、亞細(xì)胞器或小的組分以進(jìn)行后續(xù)的生物化學(xué)研究。大腸桿菌細(xì)胞
的破碎會產(chǎn)生包含不同質(zhì)量的微粒的細(xì)胞膜和胞質(zhì)物。這些微?？梢酝?br>過離心來分離，這是一個(gè)通過加大對溶劑中微粒的壓力來加快沉降速率
的過程。

(本文由上海光學(xué)儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復(fù)制http://www.sgaaa.com)