Selleck（中國，上海藍木化工有限公司）是美國Selleck Chemicals在上海設(shè)立的子公司，全權(quán)負責其全線產(chǎn)品在中國區(qū)域的銷售。Selleck Chemicals是*的高性能的生命科學產(chǎn)品供應商之一，主要致力于提供MAPK和PI3K/Akt/mTOR等上百個信號通路的高特異性小分子抑制劑。Selleck 產(chǎn)品線補充非常及時，可以提供行業(yè)內(nèi)較早的抑制劑類產(chǎn)品。同時Selleck也是專業(yè)的高通量篩選抑制劑分子庫、API、天然產(chǎn)物和多肽供應商。

Selleck的所有產(chǎn)品僅可用于科研目的的生物學實驗（for research use only），嚴禁用于人體或動物的醫(yī)療目的。

Rapamycin (Sirolimus)生物活性產(chǎn)品描述Rapamycin (Sirolimus)是一種選擇性的mTOR抑制劑，IC50為~0.1 nM。靶點mTORIC50~0.1 nM [1]體外研究Rapamycin作用于HEK293細胞，抑制內(nèi)源性mTOR活性，IC50為~0.1 nM,而iRap和AP21967 作用時，IC50分別為~5 nM 和~10 nM。[1] Rapamycin處理釀酒酵母，誘導細胞周期停在G1/S期，且抑制翻譯。[2] Rapamycin顯著抑制T98G和U87-MG細胞活力，這種作用具有劑量依賴性，IC50分別為2 nM和 1 M, 而對U373-MG細胞沒有作用活性，IC50 25 M。Rapamycin(100 nM) 作用于對Rapamycin敏感的U87-MG和T98G細胞，通過抑制mTOR功能，而誘導細胞周期停在G1期，也誘導自噬而不是凋亡。[6]體內(nèi)研究在體內(nèi)，Rapamycin 處理，特定阻斷mTOR下游靶點，如p70S6K磷酸化和激活，和PHAS-1/4E-BP1導致的eIF4E抑制釋放, 完全阻斷跖肌重量和纖維尺寸的肥厚增高。[3] 短期Rapamycin處理,即使按zui低劑量0.16 mg/kg處理, 強抑制p70S6K活性, 與提高的腫瘤細胞死亡和Eker腎臟腫瘤壞死相關(guān)。[4] Rapamycin作用于CT-26移植瘤模型，通過降低VEGF產(chǎn)量，及阻斷VEGF誘導的內(nèi)皮細胞信號，而抑制轉(zhuǎn)移性腫瘤生長和血管新生。[5] Rapamycin每天按4 mg/kg劑量處理C6移植瘤，顯著降低腫瘤生長，和腫瘤血管通透性。[7]特征 推薦的實驗操作(此推薦來自于公開的文獻所以Selleck并不保證其有效性)

激酶實驗: [1]

mTOR激酶免疫印跡法測定HEK293細胞按每孔2-2.5 105個細胞接種在12孔板上，DMEM培養(yǎng)基上血清饑餓處理24小時。使用濃度不斷增加的Rapamycin(0.05-50 nM)在 37oC下處理細胞15分鐘。加入血清，終濃度為20%，在37oC下處理30分鐘。細胞溶解，使用SDS-PAGE分離細胞裂解液。再溶解的蛋白轉(zhuǎn)移到聚偏(二)氟乙烯膜上，使用抗p70 S6激酶Thr-389的磷酸化的一抗進行免疫印跡。使用ImageQuant 和KaleidaGraph分析數(shù)據(jù)。

細胞試驗: [6]

細胞系U87-MG, T98G, 和 U373-MG濃度溶于DMSO,終濃度為~25 M處理時間72 小時方法使用不同濃度Rapamycin處理細胞72小時。為了測量細胞活力，通過胰蛋白酶化收集細胞，使用臺酚藍染色，計數(shù)每孔的存活細胞數(shù)。為了測定細胞周期, 使細胞胰蛋白酶化,與70%乙醇混合, 使用碘化丙啶染色。使用FACScan流式細胞儀和CellQuest軟件分析樣本DNA含量。為了測定凋亡, 細胞染色，通過末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶調(diào)節(jié)的dUTP缺口末端標記法（TUNEL）技術(shù)，使用一個ApopTag凋亡檢測試劑盒對細胞進行染色。為了測定酸性囊泡細胞器(AVO)的進展,使用吖啶橙(1 g/mL)對細胞進行染色15分鐘，使用熒光顯微鏡檢測。為了量化AVOs的進展,使用吖啶橙(1 g/mL) 對細胞進行染色15分鐘, 然后使用胰蛋白酶-EDTA使其從實驗板上移除，zui后使用FACScan流式細胞儀和CellQuest 軟件分析。為了分析自噬過程，細胞和0.05 mM丹(磺)酰戊二胺(MDC)在37oC下溫育10分鐘，然后在熒光顯微鏡下觀察。

動物實驗: [7]

動物模型皮下接種表達VEGF-A的C6大鼠膠質(zhì)瘤細胞的無胸腺Nu/Nu小鼠配制溶于溶劑溶液(0.2% 羧甲基纖維素和0.25% Tween-80，溶于無菌水)劑量~4 mg/kg/day給藥處理腹腔注射溶解度0.5% CMC/0.25% Tween 80 30 mg/mL* 溶解度檢測是由Selleck技術(shù)部門檢測的，可能會和文獻中提供的溶解度有所差異，這是由于生產(chǎn)工藝和批次不同產(chǎn)生的正?，F(xiàn)象。

不同實驗動物依據(jù)體表面積的等效劑量轉(zhuǎn)換表（數(shù)據(jù)來源于FDA指南）

 狒狒狗猴兔豚鼠大鼠倉鼠小鼠重量 (kg)121031.80.40.150.080.02體表面積 (m2)0.60.50.240.150.050.0250.020.007Km 系數(shù)202012128653動物A (mg/kg) = 動物B (mg/kg)  動物B的Km系數(shù)動物A的Km系數(shù)

例如，依據(jù)體表面積折算法，將白藜蘆醇用于小鼠的劑量22.4 mg/kg 換算成大鼠的劑量，需要將22.4 mg/kg 乘以小鼠的Km系數(shù)（3），再除以大鼠的Km系數(shù)（6），得到白藜蘆醇用于大鼠的等效劑量為11.2 mg/kg。

大鼠劑量 (mg/kg) = 小鼠劑量 (22.4 mg/kg)  小鼠的Km系數(shù)(3) = 11.2 mg/kg大鼠的Km系數(shù)(6)

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參考文獻

[1] Edwards SR, et al. J Biol Chem, 2007, 282(18), 13395-13401.

[2] Barbet NC, et al. Mol Biol Cell, 1996, 7(1), 25-42.

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Clinical Trial Information( data from http://clinicaltrials.gov)NCT NumberRecruitmentConditionsSponsor
/CollaboratorsStart DatePhasesNCT02042326Not yet recruitingArteriovenous Malformations (Stage II to IV)Centre Hospitalier Universitaire, AmiensJanuary 2015Phase 2NCT02240407Not yet recruitingPompe DiseaseUniversity of FloridaOctober 2014Phase 1NCT02238496RecruitingBrain Tumor, Recurrent|Glioblastoma|Anaplastic Astrocytoma|Anaplastic Oligodendroglioma|Mixed GliomaAndrew Lassman|Pfizer|AEterna Zentaris|Columbia UniversityJuly 2014Phase 2NCT02177760RecruitingSevere Combined Immunodeficiency|Transplacental Maternal Engraftment|Stem Cell TransplantUniversity of California, San FranciscoJuly 2014Phase 2NCT02214706RecruitingPort-Wine StainErasmus Medical CenterJuly 2014--

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化學數(shù)據(jù)

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分子量914.18化學式

C51H79NO13

CAS號53123-88-9穩(wěn)定性3年 -20℃粉狀6月-80℃溶于DMSO別名 溶解性 (25 C) *體外DMSO20 mg/mL (21 mM)水 1 mg/mL ( 1 mM)乙醇 1 mg/mL ( 1 mM)體內(nèi)0.5% CMC/0.25% Tween 8030 mg/mL*  1 mg/ml 指產(chǎn)品微溶或不溶
* 溶解度檢測是由Selleck技術(shù)部門檢測的，可能會和文獻中提供的溶解度有所差異，這是由于生產(chǎn)工藝和批次不同產(chǎn)生的正常現(xiàn)象。Chemical Name(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-Hexadecahydro-9,27-dihydroxy-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-hydroxy-3-methoxycyclohexyl]-1-methylethyl]-10,21-dimethoxy-6,8,12,14,20,26-hexamethyl-23,27-epoxy-3H-pyrido[2,1-c][1,4]oxaazacyclohentriacontine-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-pentone