氣一液層析純化能得到很高的分辨率和靈敏度

  采用任何純化操作不可避免地會丟失一些物質(zhì)。純化的
步驟應(yīng)越少越好，這一點很重要。因此，所用的技術(shù)必須對小
量的物質(zhì)能給出最大的分辨率。薄層層析、氣一液層析、醋酸
纖維素電泳、圓盤電泳、離子交換和親和層析等技術(shù)是非常適
用的。最好的方法可能是氣一液層析(在能適用的情況下)，因
為它能得到很高的分辨率和靈敏度，并且可用于定性和定量
的分析。在這方面氮氣檢測器特別優(yōu)越，因為預(yù)純化所需要
的量最小。
  在能使用的情況下，親和層析是十分有用的，因為它是以
生物特異性為基礎(chǔ)。從理論上講它能給出絕對的純化作用和
很高的產(chǎn)率。這項技術(shù)的潛力至今還沒有充分的發(fā)揮，特別
是在用于大量物質(zhì)的分離方面。液一液分配層析、吸附柱層析
和通透層析技術(shù)一般不作為分析性分離，因為它們的分辨能
力一般較低，并且可能發(fā)生物質(zhì)的顯著丟失。

制備性分離
  高分辨率的分離方法一般具有有限的能力，不能用于大
量物質(zhì)的分離。因此，在制備性分離中，通常先使用大容量的
方法，因而可能分辨率很低。所以，沉淀、透析、吸附、液一液分
配柱層析和逆流分溶等技術(shù)是重要的，因為，雖然它們不可能
達(dá)到其他方法那樣好的分辨率，但它們能按比例地增加來對
付大量的物質(zhì)。然后，可以使用一些高分辨率的方法，如離子
交換、制備性凝膠電泳和制備性氣一液層析，用作最后的純化。
  分離所用的方法應(yīng)盡可能地根據(jù)許多不同的特性為基
礎(chǔ)。當(dāng)使用現(xiàn)代分離技術(shù)時，在使用了一種特殊的方法以后，
接著使用一種按相同物理特性來分離的方法是很難得到進(jìn)一
步的純化。
  面臨著要選擇一種特殊的方法(或一些方法)來純化一種
化合物，很明顯的，雖然理論上可以使用幾種技術(shù)，但實際上，
某些技術(shù)可能更好一些。在決定采用哪一種技術(shù)時，應(yīng)當(dāng)考
慮到一些因素，包括:
  (1)是分析性的分離，還是制備性的分離，以便考慮技術(shù)
的分辨率和(或)能力，
  (2)化合物的物理特性，如溶解度、揮發(fā)性、分子量和電
荷特性，
  (3)化合物在特殊處理時的穩(wěn)定性，
  (4)考慮文獻(xiàn)中所記載過的比較成功的分離方法，
  (5)設(shè)備和技術(shù)條件，
  (d)方法的費用。

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