復(fù)合細(xì)胞結(jié)構(gòu)層析的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)分析顯微鏡

  親和層析的應(yīng)用
  用這種技術(shù)所純化的酶和其他蛋白質(zhì)的數(shù)目急劇增加就
已經(jīng)顯示了親和層析的巨大潛力。尤其是谷氨酞胺合成酶(一
種異構(gòu)酶)一類。此外，也已純化了很多抗原、抗體和核酸。最
令人鼓舞的特色是這種技術(shù)可能提供了研究激素和藥物受體
以及其他復(fù)合的細(xì)胞結(jié)構(gòu)的一種手段，而這些至今證明是十
分困難的。

  在實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)生產(chǎn)的實(shí)用生物化學(xué)中日益顯得重要的
一種技術(shù)是所謂固相酶的使用。如同親和層析那樣，它是把
一種酶通過(guò)共價(jià)的結(jié)合，固定到一種不溶性的基質(zhì)上，使它具
有了游離的酶所沒(méi)有的一些特殊的優(yōu)點(diǎn)。被固定的酶增加了
對(duì)熱和蛋白水解酶的穩(wěn)定性，并且能裝到柱里。在這種條件
下，當(dāng)一種適當(dāng)?shù)牡孜锶芤和ㄟ^(guò)柱時(shí)，仍然能催化它的正常
反應(yīng)，而得到一個(gè)沒(méi)有酶的產(chǎn)物，而留下的酶還可進(jìn)一步使
用。另一種情況，在杯式操作中，不溶性的酶可以通過(guò)過(guò)濾或
離心來(lái)回收，而又不會(huì)失去其活性。在不溶性酶中所進(jìn)行的
反應(yīng)與親和層析中所談到的十分類似。

  高壓液體層析
  市場(chǎng)上供應(yīng)的儀器，最近已發(fā)展了可在高壓下，通常用柱
層析法來(lái)進(jìn)行化合物的分離。細(xì)鋼管中裝有固定相，移動(dòng)的
液相用泵在壓力下通過(guò)柱。因此，柱可以做得比通常使用的
長(zhǎng)得多，并且往往顯著地縮短了分離的時(shí)間。在這些條件下
也能應(yīng)用吸附、液一液分配、離子交換和凝膠通透層析的原理，
因此這種技術(shù)的用途是很廣的。這種儀器通常附有一個(gè)或多
個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)，能連續(xù)地監(jiān)測(cè)從柱上流出的洗脫液。

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