疫熒光法切片的顯微鏡觀察標(biāo)本結(jié)構(gòu)清晰度

  (1)甘油：甘油(glycerin)作為封固劑多用于運動終板、脂肪
、類脂質(zhì)等標(biāo)本的封片，既可以采用稀釋的甘油封片，也可以使用
純甘油封片。純甘油除了可對標(biāo)本封片外，同時還具有對標(biāo)本的防
腐作用，因為甘油本身具有吸水性。由于甘油的折光率(1．473)低
于組織標(biāo)本的折光率(1．53～1．54)，所以封固后的組織細(xì)胞在光
鏡下觀察時，其清晰度不是很好。因此，甘油封片的組織切片通常
是在低倍光鏡下觀察的。
  (2)液狀石蠟：液狀石蠟(1iquid paraffin，石蠟油paraffino
il)是石油化工的一個產(chǎn)品，其內(nèi)雜質(zhì)含量較少，折光率為1．471
，多數(shù)情況下使用在整體標(biāo)本的封固方面。另外，由于液狀石蠟很
少引起非特異性熒光反應(yīng)，因此也用于免疫熒光法切片的封固。
  (3)新型水溶性封固劑：一種人工合成的新型封固劑，其最大
的特點是：封固時不需要蓋玻片，封固劑為水溶性的液體，但封固
后則在標(biāo)本表面凝固為透明薄膜，如ClearmountTM。適用于石蠟切
片、冰凍切片以及不能進行乙醇脫水的組織染色。
  2．固體封固劑  甘油一明膠(glycerin-jelly)為固體封固劑
，現(xiàn)在已不常使用了，某些實驗室會在脂肪染色、組織化學(xué)的某些
酶類染色以及部分免疫組化染色后使用。甘油一明膠的折光率較純
甘油的折光率要高一些，因此光鏡下標(biāo)本結(jié)構(gòu)的清晰度也有所提高
。與其他水溶性封固劑不同的是其封固后具有一定的凝固性，這是
由于明膠的熔點(約65～70℃)要高于室溫的緣故。
也小，只是封固切片的凝結(jié)時間要相對延長，一般需要3～6個月，
但凝結(jié)后的切片堅硬牢固，不怕磨損。隨著時間的推移，切片內(nèi)樹
膠氧化(日光、燈光照射)逐漸變成黃色，同時也伴隨組織顏色的
減退。

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