不同放大倍數(shù)的光鏡下觀察蓋玻片細(xì)胞特點(diǎn)
常規(guī)石蠟切片封固方法
蓋玻片
蓋玻片俗稱為蓋片。蓋玻片應(yīng)用最多的是保存已染色的組織,
并使組織在不同放大倍數(shù)的光鏡下均可得到較好的觀察結(jié)果。對(duì)于
蓋玻片的選擇完全取決于實(shí)驗(yàn)者的喜好,蓋玻片的厚度在150~200
μm,而它的長(zhǎng)寬之比卻變化多樣,有18mmX 18mm、18mmX24mm、18
mmX 36mm、24μmX 24mm、24mm×32mm、24mm×50mm等樣式,可依
據(jù)實(shí)際需要選擇適宜的蓋玻片進(jìn)行封固,注意隨著蓋玻片厚度的增
加,組織切片的透明度將減低。
蓋玻片有圓形、正方形和長(zhǎng)方形3種形狀,圓形蓋玻片常常用于
細(xì)胞涂片封固,正方形和長(zhǎng)方形蓋玻片適用于組織切片封固。蓋玻
片大小應(yīng)與標(biāo)本大小相適宜,一般標(biāo)本四周留有2mm的空間,相反
,標(biāo)本邊緣與蓋玻片邊緣平齊則很容易導(dǎo)致標(biāo)本邊緣顏色減退。
封固的目的
組織切片經(jīng)過染色、脫水、透明等一系列步驟后就可以進(jìn)行最后
的封固程序了。封固(mounting)的目的在于染色切片能長(zhǎng)期保存,
更重要的是在光鏡下組織細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu)能清晰地被觀察到。
封固劑種類
很少有染色切片不用封固而直接在光鏡下觀察的,通常使用一種
介質(zhì)將蓋玻片蓋在染色組織的表面,這種起黏附功效的介質(zhì)被稱為
封固劑。常用的封固劑大致分為兩類,一類為水性封固劑,一類為
干性封固劑。封固劑的選用主要依據(jù)染色反應(yīng)的要求。
(一)水性封固劑
水性封固劑又可稱為水溶性封固劑,染色后的組織切片直接就可
以進(jìn)行封片,而無(wú)需要進(jìn)行常規(guī)的脫水透明程序。水溶性封固劑有
兩種類型。
液體封固劑液體封固劑其本身呈液體狀,即使封固后的切
片也具有一定的流動(dòng)性,不會(huì)被空氣所蒸發(fā)。封固后的切片保存有
一定的要求,最好將蓋玻片四周用樹膠或石蠟液或橡皮泥密封,防
止蓋玻片移動(dòng)而損傷組織。若短時(shí)保存,則無(wú)需將蓋玻片四周密封
,只需將染色切片平放在干凈處即可。
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