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非洲豬瘟防控之精制卵黃抗體實(shí)驗(yàn)表明，VERO細(xì)胞保護(hù)率50～95%，巨噬細(xì)胞保護(hù)率40～85%。用抗體，育肥豬后感染病毒半數(shù)感染量（TCID50）低于102，保護(hù)率為40～85%；先感染病毒，血液病毒HAD50低于103，保護(hù)率大約為30～70%。感染的病毒量越大，保護(hù)率越低，侵入免疫系統(tǒng)越快，則發(fā)病越快，保護(hù)率也隨之下降，此時(shí)抗體需要量要大很多。

非洲豬瘟防控之精制卵黃抗體?

 

精制卵黃抗體凍干粉就是將精制抗體液體包被后，利用零下40℃低溫真空捕水直接升華成可溶性粉。本品為淡黃色粉末。

規(guī)格：每桶10公斤，少量需要請(qǐng)?zhí)崆罢f(shuō)明。

成分：本國(guó)流行非洲豬瘟野毒株抗體。

含量：每克抗體凍干粉含非洲豬瘟抗體大于100納克。

使用：可以添加到粉劑、散劑、中藥提取物里等等，連用3天，15到20天用一次，嚴(yán)重地區(qū)一周用一次，一次2到3天。一般2小時(shí)內(nèi)飲完。

原粉使用：以下為育肥豬、成年豬推薦使用標(biāo)準(zhǔn)，仔豬和保育豬可適當(dāng)加量30～40%。

無(wú)病毒污染區(qū)使用預(yù)防：1克600公斤體重。

病毒污染區(qū)但本場(chǎng)檢測(cè)不到病毒使用量：1克400公斤體重。

病毒污染區(qū)本場(chǎng)能夠檢測(cè)到病毒但豬不發(fā)?。摲冢┑氖褂昧浚?/p>

1克300公斤體重。

病毒污染區(qū)本場(chǎng)能夠檢測(cè)到病毒并且豬有開(kāi)始輕微發(fā)病的使用量：1克150到200公斤體重。再?lài)?yán)重一些，病毒檢測(cè)量在兩個(gè) + 號(hào)以上，可以增加到1克75公斤到100公斤體重。

病毒污染區(qū)本場(chǎng)豬只大量發(fā)病且死亡快速且大量死亡的，不吃不喝的，不建議治療，如果獸醫(yī)愿意試著治療，可以選用注射用液體非洲豬瘟抗體。

保存：常溫、蔭涼、避光、通風(fēng)處保存。有條件的地方冷藏更好。

 

有關(guān)問(wèn)題

1、為什么要選用本國(guó)流行株？

答：非洲豬瘟具有眾多的基因型，該病毒擁有重多的可變重組區(qū)，各病毒之間缺乏覆蓋交叉，所以一定要選用當(dāng)?shù)亓餍兄曜隹贵w才有一定的效果。現(xiàn)在我們的毒株來(lái)自發(fā)病的俄羅斯，什么原因大家都知道，全國(guó)就是一個(gè)毒株，但是將來(lái)毒株有可能會(huì)變化，甚至再傳來(lái)新的毒株，那時(shí)候更需要分離出流行毒株來(lái)做新的抗體，所以一定要使用當(dāng)?shù)亓餍卸局辍?/p>

2、非洲豬瘟抗體的效果如何？

答：實(shí)驗(yàn)表明，VERO細(xì)胞保護(hù)率50～95%，巨噬細(xì)胞保護(hù)率40～85%。

 

先用抗體，育肥豬后感染病毒半數(shù)感染量（TCID50）低于102，保護(hù)率為40～85%；先感染病毒，血液病毒HAD50低于103，保護(hù)率大約為30～70%。感染的病毒量越大，保護(hù)率越低，侵入免疫系統(tǒng)越快，則發(fā)病越快，保護(hù)率也隨之下降，此時(shí)抗體需要量要大很多。非洲病毒在血液和組織中的病毒量大小能差幾十倍到一百萬(wàn)倍，有的病豬身上病毒量可高達(dá)107TCID50或者109HAD。而且非洲豬瘟的危害不單單是病毒量的問(wèn)題，它還有兩個(gè)大問(wèn)題，一是病毒攻擊心、腦、肺、肝、腎和血管系統(tǒng)等核心器官，二是病毒引起的類(lèi)似細(xì)胞因子風(fēng)暴的自身的免疫的嚴(yán)重問(wèn)題，大量的干擾素、腫瘤因子和白介素等過(guò)來(lái)攻擊正常細(xì)胞并破壞正常細(xì)胞，造成嚴(yán)重的豬體損傷，這與病毒本身沒(méi)有直接關(guān)系，而且后者在發(fā)病后期起的作用更大，但已經(jīng)與病毒和抗體無(wú)關(guān)了，所以用抗體眼觀癥狀并不能短時(shí)間減輕，盡管中和病毒后，過(guò)分的免疫反應(yīng)有可能下降，但豬有可能等不到那個(gè)時(shí)候了。這才是非洲豬瘟的可怕之處。這也就是為什么非洲豬瘟要立足 預(yù)防 和早期治療，而不能將重點(diǎn)放到如何把病重豬救過(guò)來(lái)的原因。

 

3、非洲豬瘟用抗體直接注射效果如何？

答：如果豬高燒不退不吃不喝，也只有液體抗體注射試試了。一般來(lái)說(shuō)，豬的主器官?zèng)]有被攻擊，沒(méi)有形成細(xì)胞因子風(fēng)暴，就有戲，概率可能達(dá)到一半對(duì)一半，如果病毒量大且大量攻擊主器官，同時(shí)還形成細(xì)胞因子風(fēng)暴，那豬硬打過(guò)來(lái)的概率應(yīng)該在30%以下，甚至一些獸醫(yī)2018年秋冬就反映，無(wú)論打什么藥，打一個(gè)死一個(gè)（注：那時(shí)還沒(méi)有抗體制作出來(lái)）。

4、非洲豬瘟抗體能保100%嗎？

答：不能，這個(gè)病毒會(huì)在我國(guó)長(zhǎng)期存在，就目前的防控措施和技術(shù)來(lái)說(shuō)，這個(gè)病毒來(lái)了就走不了了，流行株的抗體能有效減少病毒的復(fù)制和降低病毒滴度，增加豬的成活率，減少發(fā)病率，但它不會(huì)完全清除病毒。原因：一是外在的類(lèi)似循環(huán)抗體不會(huì)將全身的病毒清除干凈，病毒在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞在氣管和腸道表面時(shí)，是不會(huì)被抗體接觸到的，即循環(huán)抗體只能降低病毒滴度，但不能阻止病毒的侵入和排出，但能減少病毒在體內(nèi)的復(fù)制并遲滯病毒的發(fā)作時(shí)間，只要不出現(xiàn)病毒大量突破免疫屏障，豬就不會(huì)大面積發(fā)病。二是非洲豬瘟的傳播途徑太多，一些豬場(chǎng)的飲水和污水中都能檢測(cè)到活病毒，這些都不是抗體所能解決的。生物安全措施需要多方面配合，共同起作用。一些豬場(chǎng)的水源、糞水、豬舍中都能檢出大量的非洲豬瘟病毒，一些運(yùn)輸車(chē)輛上也能檢測(cè)到病毒，此外屠宰、加工、檢疫以及泔水處理等過(guò)程都有大量的安全隱患，這些都不是單靠豬只飲飲抗體就能解決的。

5、為什么不建議對(duì)大面積快速死亡的群體進(jìn)行治療？

答：抗體粉主要用于無(wú)病毒的 預(yù)防 和低病毒感染時(shí)的壓制和中和，病毒突破免疫屏障大量復(fù)制并攻擊心、肺、肝、脾、腎、腸、骨等主器官時(shí)，高燒不退，它本身就不吃不喝了，只有注射這個(gè)途徑了，所以得另外使用注射用非洲豬瘟抗體了，注射治療方法也不是不能用，如果發(fā)病前期和中期不到晚期都有一定的希望，這主要考驗(yàn)獸醫(yī)的診斷和判斷水平。

這里面特別要注意的是，育肥豬和成年豬的死亡，一半或不到一半原因是因?yàn)椴《疽鸬?，一半或一半以上的原因是豬自身的免疫反應(yīng)引起的，一種情況是非洲豬瘟通過(guò)單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制，整個(gè)免疫系統(tǒng)對(duì)它沒(méi)有反應(yīng)，當(dāng)成了 自己人 ，第二個(gè)原因是病毒攻擊主器官，會(huì)直接造成器官衰竭和豬只死亡，第三個(gè)原因是細(xì)胞因子風(fēng)暴，它比過(guò)敏反應(yīng)還厲害。當(dāng)然，作為獸醫(yī)，試圖對(duì)非洲豬瘟進(jìn)行不計(jì)成本的治療，以期取得一定的經(jīng)驗(yàn)，以便對(duì)相關(guān)疾病的治療界限進(jìn)行探索，是應(yīng)該得到鼓勵(lì)的。有些是經(jīng)驗(yàn)問(wèn)題，有些是實(shí)踐問(wèn)題，必須在實(shí)踐中培養(yǎng)相關(guān)技能。就象有的豬場(chǎng)發(fā)病后，1000頭豬能死的只剩下十幾頭，而有的豬場(chǎng)發(fā)病后，同一個(gè)病毒，幾個(gè)月就死了十幾頭，這些經(jīng)驗(yàn)都需要反思相關(guān)經(jīng)歷和多方交流。

6、唾液中的病毒和血液中的病毒關(guān)系如何？精液中能檢出病毒病嗎？

答：病豬唾液中的病毒釋放與豬血液中的呈平行關(guān)系，這個(gè)國(guó)外早已知道。唾液中的病毒幾乎和血液中相等伴行。只不過(guò)采集唾液容易，采血難度大一點(diǎn)。但是實(shí)際上采血反而比唾液更準(zhǔn)確一些，因?yàn)椴赏僖哼\(yùn)作本身的誤差大一些。病豬的唾液腺整天分泌帶有大量病毒的唾液進(jìn)入口腔和消化道，讓豬整天無(wú)時(shí)無(wú)刻不在感染病毒，這是非洲豬瘟易于感染的一個(gè)重要原因，所以在這個(gè)意義上，來(lái)說(shuō)讓豬飲或吃一些抗體，在口腔和腸道及時(shí)中和病毒是非常關(guān)鍵的。

 

公豬精液中也能檢測(cè)出病毒，輸精會(huì)造成病毒感染母豬。精液中出現(xiàn)病毒應(yīng)該稍晚于血液中。所以，輸精前進(jìn)行病毒檢測(cè)也是十分必要的，輸精感染是非洲豬瘟傳播的一個(gè)重要途徑，要盡量避免將陽(yáng)性公豬精液輸給未感染病毒的母豬。

7、非洲豬瘟膠體金快速診斷試紙的準(zhǔn)確度如何？能不能完全替代PCR基因檢測(cè)？

答：非洲豬瘟膠體金快速診斷試紙能夠檢測(cè)到一定量的非洲豬瘟病毒，如果把病豬身上的病毒分為四個(gè)等級(jí)（四個(gè) + 號(hào)），試紙能比較容易檢測(cè)到三個(gè)和四個(gè) + 號(hào)的病毒，而兩個(gè) + 號(hào)的病毒眼觀能看到，但已經(jīng)不太明顯了，一個(gè) + 號(hào)的病毒一般不太好檢測(cè)到。一般來(lái)說(shuō)，患病豬如果在病毒血癥時(shí)，能夠檢測(cè)到，如果病毒在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞內(nèi)而不在血清中時(shí)，試紙的靈敏度就明顯下降了，當(dāng)然，從技術(shù)角度考慮，也需要在病毒洗脫液上進(jìn)行細(xì)胞裂解的配方調(diào)整。當(dāng)然有的試紙根本檢測(cè)不到明顯的病毒，那屬于質(zhì)量問(wèn)題，這種劣質(zhì)產(chǎn)品或不合格產(chǎn)品很快就會(huì)被淘汰掉。

 

也就是說(shuō)，如果一個(gè)豬場(chǎng)發(fā)生了非洲豬瘟，用試紙檢測(cè)多檢測(cè)幾頭豬，盡量減少失誤，因?yàn)閺牟《镜膹?fù)制曲線來(lái)看，假定豬只發(fā)病二十天時(shí)間，病毒大量存在于血清中的時(shí)間也就是四五天，那么試紙能明顯眼觀檢測(cè)到的時(shí)間也只有四五天時(shí)間，其它時(shí)間檢測(cè)不到，豬只一般很少一齊發(fā)病，前后有個(gè)時(shí)間差，所以一定要多檢測(cè)幾頭，如果是陽(yáng)性，那肯定的是發(fā)病了，如果沒(méi)有檢測(cè)到，也不一定沒(méi)有感染，這時(shí)可以用PCR儀進(jìn)行檢測(cè)和確診。試紙本身并不擴(kuò)增病毒，而PCR儀則能成百萬(wàn)千萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增相關(guān)基因片段。

這里需要說(shuō)明的一點(diǎn)，目前試紙的靈敏度也就是三個(gè)或四個(gè) + 號(hào)，病毒在細(xì)胞中的量一般是一個(gè)或兩個(gè) + 號(hào)的問(wèn)題，并不單是試紙的病毒洗脫液加不加細(xì)胞裂解液的問(wèn)題。

需要說(shuō)明的是，檢測(cè)非洲豬瘟不是什么高科技，是縣級(jí)及以上級(jí)獸醫(yī)站的基本功能，作為一項(xiàng)技能，經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的普通獸醫(yī)專(zhuān)業(yè)專(zhuān)科生本科生也能熟練掌握，沒(méi)有必要將它神圣化，至于一些禁令，那是政治問(wèn)題和行政問(wèn)題，不是也不屬于科學(xué)技術(shù)問(wèn)題，不在一個(gè)層面上。

8、非洲豬瘟病毒有沒(méi)有抗體依賴(lài)增強(qiáng)現(xiàn)象(ADE)，象豬藍(lán)耳病那樣，有低水平抗體存在時(shí)，病毒反而復(fù)制得更多了？

答:幾十年來(lái)，盡管有極個(gè)別專(zhuān)家懷疑，但始終沒(méi)有發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病毒有抗體依賴(lài)現(xiàn)象，非洲豬瘟病毒沒(méi)有抗體FC、受體、配體和病毒組成復(fù)合物現(xiàn)象，所以不產(chǎn)生象艾滋病、登革熱、和豬藍(lán)耳病那樣的抗體依賴(lài)增強(qiáng)現(xiàn)象。

 

9、非洲豬瘟為什么這么厲害？

答：非洲豬瘟的厲害，我們的感受和國(guó)外的感受不一致，國(guó)外主要是病毒不斷變化，多個(gè)毒株反復(fù)流行，饒是西方集約化科技化程度高，防控難度也很大。我們的病毒只有一株，從俄羅斯直接拉了過(guò)來(lái)，8個(gè)月全國(guó)就被攻陷，我們遇到的主要問(wèn)題是落后的集約化生產(chǎn)、笨拙的疫控架構(gòu)和弄虛作假的應(yīng)對(duì)模式。

非洲豬瘟厲害之處是它主要通過(guò)白細(xì)胞中的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞復(fù)制，免疫系統(tǒng)因自身識(shí)別問(wèn)題不能立即產(chǎn)生針對(duì)性免疫反應(yīng)，等病毒傳遍全身，攻陷主器官造成主器官衰竭和造成遠(yuǎn)端循環(huán)崩潰時(shí)，加上同時(shí)出現(xiàn)的細(xì)胞因子風(fēng)暴，病豬幾乎沒(méi)有一點(diǎn)反抗就被 內(nèi)外殺手 殺死了，大部分豬根本沒(méi)有時(shí)間產(chǎn)生血清學(xué)免疫反應(yīng)就陣亡了，所以常出現(xiàn)1000頭豬只剩20來(lái)頭有免疫反應(yīng)的耐過(guò)豬，而且一部分康復(fù)豬仍攜帶著病毒。

當(dāng)然不是所有豬場(chǎng)都死光了，就是在大片豬場(chǎng) 清圈 時(shí)，仍有個(gè)別豬場(chǎng)一兩個(gè)月內(nèi)只出現(xiàn)個(gè)別死亡，一直不出現(xiàn)大面積死亡，而且毒株沒(méi)有弱化，還是同一個(gè)毒株，這里面有一些問(wèn)題需要澄清，盡管非洲豬瘟病毒很厲害，但也要突破豬的各級(jí)屏障，首先它要侵入單核細(xì)胞，如果它進(jìn)入不了淋巴結(jié)和扁桃體，說(shuō)什么也沒(méi)有用，二是要能大量復(fù)制并釋放到血液中，第三還得進(jìn)入重要器官和破壞血液循環(huán)，才能殺死豬，同時(shí)它還需要大量排出，如果不能大量排出并感染其它豬只，它也傳不出去。非洲豬瘟病毒和其它烈性病毒一樣，初始進(jìn)入豬體復(fù)制的病毒，和大量傳播時(shí)的病毒的表面抗原的空間結(jié)構(gòu)有可能是不一樣的，就象士兵剛好戰(zhàn)場(chǎng)常忘上帶槍一樣，而經(jīng)過(guò)豬體復(fù)制而排出的病毒明顯都帶了槍?zhuān)@個(gè)過(guò)程盡管目前還不大清楚，但在一引起豬場(chǎng)中卻能夠很明顯地看到這種現(xiàn)象，有的豬場(chǎng)，幾千頭豬，二十天就光了，有的豬場(chǎng)，同樣的病毒，卻沒(méi)死幾頭豬，這里邊除了非洲豬瘟病毒是接觸性病毒，豬場(chǎng)管理好、污染少、不交叉感染之外，豬本身的各種屏障也起著很重要的作用，特別是不讓非洲豬瘟病毒達(dá)到大量傳播的初始條件是很關(guān)鍵的。在病毒感染早期，使用非洲豬瘟抗體，使得病毒數(shù)量被抑制，無(wú)法轉(zhuǎn)化為能夠大量傳播復(fù)制的攻擊型病毒，也是一個(gè)很關(guān)鍵的因素。否則，病毒一旦進(jìn)入瘋狂傳播飛速侵入體內(nèi)并大舉進(jìn)入豬血液循環(huán)和內(nèi)臟器官時(shí)，就很難再控制了。這時(shí)病毒很瘋狂破壞單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、骨內(nèi)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等，隨著豬各個(gè)主系統(tǒng)的崩潰，豬就很難活下來(lái)了，即豬被病毒一氣鑿死，沒(méi)有反擊的機(jī)會(huì)，更產(chǎn)生不了相應(yīng)的抗體。相反地，如果病毒被長(zhǎng)期抗拒在血液系統(tǒng)之外，只在消化道和呼吸系統(tǒng)表面活動(dòng)，那豬就有可能產(chǎn)生正常的免疫反應(yīng)，從而產(chǎn)生良好的抗體，所以早期使用非洲豬瘟抗體達(dá)到這一目的，就很成功了。而不是發(fā)病或重病后，看是不是能在大群死亡中救過(guò)來(lái)幾頭豬的問(wèn)題了。

 

10、非洲豬瘟未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)和應(yīng)對(duì)策略如何？

答：由于我國(guó)落后的集約化生產(chǎn)模式，主是是硬件有，疫控和安全生產(chǎn)上的軟件不足，軟制度約束沒(méi)有，比如最基本的自測(cè)自檢都做不到，在硬件上投錢(qián)可以，軟件上的人力物力投入高度不足，加上笨拙的疫控手段、稀缺的產(chǎn)業(yè)保護(hù)機(jī)制保險(xiǎn)機(jī)制以及不好意思說(shuō)的弄虛作假的應(yīng)對(duì)策略，非洲豬瘟?xí)谖覈?guó)長(zhǎng)期存在，甚至不能杜絕新的毒株 被引進(jìn) 的怪事再發(fā)生，目前毒株的長(zhǎng)期存在，肯定會(huì)發(fā)生一些進(jìn)化上的適應(yīng)，非洲豬瘟是一個(gè)高度適應(yīng)外界變化的毒株，其在開(kāi)放閱讀框和非編碼區(qū)常有核酸變化，特別是LVR等區(qū)的串聯(lián)重復(fù)部分。

       

也就是說(shuō)，非洲豬瘟?xí)谖覈?guó)長(zhǎng)期存在，此起彼伏，在傳播過(guò)程中會(huì)漸漸趨弱，會(huì)有一些弱毒株出現(xiàn)。應(yīng)對(duì)措施會(huì)出現(xiàn)三種情況相結(jié)合，一是 拔牙療法 ：那個(gè)豬發(fā)病就處理掉，不發(fā)病的繼續(xù)養(yǎng)，在事實(shí)上放棄發(fā)現(xiàn)即隔離、封鎖和疫區(qū)全部撲殺的方法，盡管偶爾會(huì)在個(gè)別小地方報(bào)一下疫情；二是使用疫苗，發(fā)現(xiàn)天然弱毒株或人工致弱毒株做弱毒苗，給豬免疫減輕疾病的危害程度，當(dāng)然這樣更會(huì)使豬群長(zhǎng)期攜帶病毒；三是使用非洲豬瘟抗體，減少病毒在初期對(duì)豬的侵入，阻擋病毒對(duì)機(jī)體的進(jìn)一步侵害，給豬留下產(chǎn)生免疫的時(shí)間，減少?gòu)?qiáng)毒株的傳播。當(dāng)然，當(dāng)非洲豬瘟進(jìn)一步發(fā)展和相對(duì)弱化后，其它豬的疾病也都重新進(jìn)入人們的視線了，比如豬瘟、藍(lán)耳、圓環(huán)、偽狂犬、副豬、鏈球菌等等，很明顯，混合感染的豬場(chǎng)死亡率又會(huì)重新上揚(yáng)，控制起來(lái)更為復(fù)雜困難。下圖為某場(chǎng)非洲豬瘟與藍(lán)耳混合感染，800頭豬還剩18頭，其中所謂康復(fù)豬里仍攜帶這兩種病毒，而且量還不少。這種混合感染在今明兩年會(huì)大量出現(xiàn)，要高度重視。

 

11、為什么不用豬作抗體？家禽抗非洲豬瘟抗體如何做？

答：在強(qiáng)毒株攻擊下，一般只有10%的豬產(chǎn)生抗體，而且抗體還一定高，更危險(xiǎn)的是其中一些康復(fù)豬即使有抗體但仍然有可能攜帶病毒，現(xiàn)在也沒(méi)有我國(guó)流行毒株的弱毒株疫苗，所以豬不能作抗體的供體。牛、馬等比豬貴，成本也很高，所以只有用家禽來(lái)說(shuō)，我國(guó)家禽數(shù)量巨大，禽蛋產(chǎn)量巨大，易得，成本還低很多，非洲豬瘟的宿主只有豬，所以非洲豬瘟對(duì)家禽不產(chǎn)生毒副作用，禽蛋也不攜帶病毒。而家禽產(chǎn)生的抗體與豬的抗體非常相近，且交叉度很高，所以利用家禽做是一種簡(jiǎn)便易行的好方案。

抗體制作大體程序如下：選取健康產(chǎn)蛋家禽，免疫接種五次以上非洲豬瘟疫苗(或毒株)，當(dāng)抗體在卵黃中大于80納克/毫升時(shí)，收取高免禽蛋，提取提純卵黃抗體，將精制卵黃液體濃縮，置于零下40℃冷凍真空干燥，收取干燥粉，粉碎過(guò)篩分裝。

12、這是不是國(guó)內(nèi)第一次利用家禽而做的抗體？

答：是的，國(guó)內(nèi)第一個(gè)，也是世界上的第一個(gè)。相關(guān)技術(shù)已申請(qǐng)，申請(qǐng)?zhí)枺?01910367734.6

非洲豬瘟防控之精制卵黃抗體?供應(yīng)

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