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Taq DNA聚合酶(5U/ L)

D1010L1178

1000 U

-20 ℃

300產(chǎn)品描述

 本制品是94kDa的耐熱性DNA聚合酶，是把Thermus aquaticus DNA Polymerase基因在大腸桿菌中進行表達后經(jīng)多次純化分離而得到的。它與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。使用本制品擴增得到的PCR產(chǎn)物的3 端附有一個"A"堿基，因此可直接克隆于T載體中。配以Life-iLab獨特配方的5 反應(yīng)緩沖液（已添加Mg2+）可獲得更加理想的擴增結(jié)果。

D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)活性定義

 在74℃條件下，30分鐘內(nèi)催化10nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個單位。

D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)產(chǎn)品特點

 高效：以入DNA為模板，擴增長度可達8kb，可以高效擴增 4kb片段。

 靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段。

 高品質(zhì)：完全滿足Real Time PCR的實驗要求。

獨特配方的5 Buffer：使PCR擴增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。

D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)產(chǎn)品用途

 常規(guī)PCR鑒定；小片段目標(biāo)基因克?。黄蕉薖CR產(chǎn)物加A；雙脫氧法測序；熒光定量PCR。

D1010L1178 Taq DNA聚合酶(5U/ L)使用建議

 使用本試劑擴增得到的PCR產(chǎn)物3 端有一突出"A"堿基，可直接克隆于T載體中。如需擴增克隆較長片段建議換用Pfu DNA聚合酶。當(dāng)擴增大片段時，Taq酶的擴增效率大大低于Taq Plus酶，在 4Kb片段的PCR擴增中建議換用Taq Plus酶。

實用實例：

例1: 50 L擴增體系中，以5ng DNA 為模板，對500bp～6.0kb

的擴增結(jié)果。

泳道M：1KB DNA Marker；

泳道1：0.5kb；泳道2：1.0kb；

泳道3：2.0kb；泳道4：3.0kb；

泳道5：4.0kb；泳道6：6.0kb；

例2: 50 L擴增體系中，分別以50ng～0.05ng人基因組DNA為模

板，可對特定基因片段（380bp）進行很好的擴增。

泳道1：50ng；泳道2：5ng；

泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；

泳道M：DNA Ladder 2000 Marker

產(chǎn)品包裝

組份

D1010L1177

D1010L1178

Taq DNA 聚合酶(5U/ L)

50 L

200 L

dNTPs混合液(各10mM)

200 L

1mL

5 Taq Buffer with Mg2+

2mL

10mL

運輸和儲存

 -20℃運輸和保存，避免反復(fù)凍融，在保存條件下可保存1年。

質(zhì)量保證

 經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE檢測僅可見清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，無核酸內(nèi)、外切酶污染。

常用反應(yīng)體系

常用PCR程序

5 x Taq Buffer

上游引物

下游引物

dNTPs(個10mM)

模板

Taq DNA聚合酶

ddH2O

10 L

0.2-1.0 M(終濃度)

0.2-1.0 M(終濃度)

1 L

1-50ng(質(zhì)粒)/10ng-1 g(基因組)

0.25 L(1.25U)

至50 L

擴增片段 3k

擴增片段 3k

94℃  90s

          94℃ 20s

30次循環(huán)  57℃ 20s

 72℃ 60s/kb

72℃  5m

4℃  保溫

94℃  

30次循環(huán)  

72℃

4℃  

 20s

94℃  5s

68℃  60s/kb

 5min

 保溫

注意事項使用方法

 1、2mM Mg2+的終濃度可以滿足絕大多數(shù)PCR擴增，對于某些PCR，為了保證較好的擴增，可調(diào)節(jié)為2-4mM。

 2、體系中加入推薦的酶量，可以滿足大多數(shù)PCR擴增，對于某些PCR，為了得到較好的擴增，可適當(dāng)增加酶量。

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