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商品貨號：MS1001
英文名稱：Micro Lacate Dehydrogenase（LDH）Assay Kit
別名：乳酸脫氫酶試劑盒 LDH Kit 乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒 乳酸脫氫酶（LDH）測試盒
檢測方法：微量法
商品貨號：商品品牌：規(guī)格基本售價選擇規(guī)格MS1001-100管/48樣索橋生物100管/48樣￥330.00元
產(chǎn)品詳細(xì)介紹 產(chǎn)品說明書
測定意義：
LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
貨號：MS1001 規(guī)格：100管/48樣
乳酸脫氫酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）試劑盒說明書
微量法
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：60mL 1瓶， 4℃保存；
試劑一：液體5mL 1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑 1支，-20℃保存，用時加入1.3 mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑
分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
試劑三：液體5 mL 1瓶，4℃避光保存；
試劑四：液體20mL 1瓶，4℃保存；
樣品測定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為1000~5000：1的比例（建議2000萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至450nm，蒸餾水調(diào)零。2、樣本測定（在EP管中加入下列試劑）
試劑名稱( L)
測定管
對照管
樣本
10
10
試劑一
50
50
試劑二
10
蒸餾水
10
充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴15min
試劑三
50
50
充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準(zhǔn)確水浴15min
試劑四
150
150
充分混勻，室溫靜置15min， 450 nm下測定吸光度，計算 A=A測定管-A對照管。每個測定管需要設(shè)一個對照管。
LDH活力單位的計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸曲線， y = 0.725x (x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度， mol/mL；y為對吸光度)。
2、血清（漿）LDH活力的計算
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/mL）= A 0.725 T 103=92 A
3、細(xì)胞、細(xì)菌和組織中LDH活力的計算
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/mg prot）=[ A 0.725 V1] (V1 Cpr) T 103 =92 A Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/g鮮重）=[ A 0.725 V1] (W V1 V2) T 103 =92 A W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/104 cell）= [ A 0.725 V1] (2000 V1 V2) T 103 =0.046 A
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01mL；V2：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，15 min；Cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/mL=103 nmol/mL。
b.使用96孔板測定的計算公式如下：
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸曲線， y = 0.3625x (x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度， mol/mL；y為對吸光度)。
2、血清（漿）LDH活力的計算
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/mL）= A 0.3625 T 103=184 A
3、細(xì)胞、細(xì)菌和組織中LDH活力的計算
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/mg prot）=[ A 0.3625 V1] (V1 Cpr) T 103 =184 A Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/g鮮重）=[ A 0.3625 V1] (W V1 V2) T 103 =184 A W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol丙酮酸定義為一個酶活力單位。
LDH（nmol/min/104 cell）= [ A 0.3625 V1] (2000 V1 V2) T 103 =0.092 A
V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01mL；V2：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，15 min；Cpr：蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，2000萬；103：1umol/mL=103 nmol/mL。
輔酶Ⅰ系列 QS1000輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法50管/24樣500MS1000輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒微量法100管/48樣920QS1001乳酸脫氫酶（LDH）測試盒可見分光光度法50管/24樣170MS1001乳酸脫氫酶（LDH）測試盒微量法100管/48樣330QS1002NAD-蘋果酸脫氫酶（NAD-MDH）測試盒紫外分光光度法50管/48樣280MS1002NAD-蘋果酸脫氫酶（NAD-MDH）測試盒微量法100管/96樣550QS1003NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測試盒紫外分光光度法50管/48樣320MS1003NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）測試盒微量法100管/96樣600QS1004NADH氧化酶（NOX）測試盒 可見分光光度法50管/48樣450MS1004NADH氧化酶（NOX）測試盒 微量法100管/96樣850QS1005-50檸檬酸合酶(CS）測試盒可見分光光度法50管/48樣3200QS1005-25檸檬酸合酶(CS）測試盒可見分光光度法25管/24樣2000MS1005檸檬酸合酶(CS）測試盒微量法100管/48樣3500QS1006丙酮酸脫羧酶（PDC）測試盒紫外分光光度法50管/48樣720MS1006丙酮酸脫羧酶（PDC）測試盒微量法100管/96樣1400QS1007醇脫氫酶（ADH）測試盒紫外分光光度法50管/48樣280MS1007醇脫氫酶（ADH）測試盒微量法100管/96樣550QS1008單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒紫外分光光度法50管/48樣800MS1008單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒微量法100管/96樣1550QS1009乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒紫外分光光度法50管/48樣420MS1009乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒微量法100管/96樣800QS1010NAD激酶（NADK）測試盒可見分光光度法50管/48樣600MS1010NAD激酶（NADK）測試盒微量法100管/48樣1100QS1011線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒 紫外分光光度法25管/24樣1280MS1011線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測試盒 微量法100管/96樣2500
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