酶復(fù)合物-大多數(shù)酶促反應(yīng)都會(huì)因時(shí)間的延長
酶促反應(yīng)初期,被轉(zhuǎn)化的底物量與正在進(jìn)行的反應(yīng)時(shí)間成正比。在
反應(yīng)開始的第一階段后,反應(yīng)速率開始下降,不再與時(shí)間成正比,這可
能是酶的自身失活,或因熱對酶的三級(jí)結(jié)構(gòu)的效應(yīng),或是由于產(chǎn)物或副
產(chǎn)物對酶的抑制的結(jié)果。研究酶促反應(yīng)初期反應(yīng)速度與反應(yīng)時(shí)間成線性
關(guān)系相變化的一段時(shí)間甚為重要,這段時(shí)間可短至一分鐘或長至幾天。
但大多數(shù)酶促反應(yīng)都會(huì)因時(shí)間的延長,隨著反應(yīng)產(chǎn)物的增加,逆向反應(yīng)
逐漸增強(qiáng),反應(yīng)速度也隨之減慢。
一般化學(xué)反應(yīng)隨反應(yīng)產(chǎn)物的逐漸增多,底物明顯減少,反應(yīng)速度下
降。酶促反應(yīng)中的產(chǎn)物抑制,是指產(chǎn)物在釋出之前也和酶以復(fù)合體(EP)
的形式存在,即產(chǎn)物也可占領(lǐng)酶分子上的特殊位點(diǎn),使酶不易與底物結(jié)
合或不易發(fā)揮作用。在雙底物雙產(chǎn)物反應(yīng)中,產(chǎn)物還可和催化過程中生
成的不同形式的酶分子結(jié)合,或者和酶。底物復(fù)合體結(jié)合,形成不能轉(zhuǎn)
變?yōu)楫a(chǎn)物的“死端”產(chǎn)物(如在乳酸脫氫反應(yīng)中,產(chǎn)物丙酮酸可形成酶
.NADH.丙酮酸復(fù)合物,也可形成丙酮酸.NAD+.酶復(fù)合物,這些都不
是反應(yīng)中的天然中間復(fù)合體,對反應(yīng)也有抑制作用);反應(yīng)液pH也可能
發(fā)生改變,導(dǎo)致酶促反應(yīng)偏離最佳條件。故線性反應(yīng)期后,反應(yīng)速度呈
現(xiàn)“非線性關(guān)系”,必須避免在非線性反應(yīng)期內(nèi)作速率監(jiān)測,否則可引
起較大誤差。
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