? 聚乙二醇(PEG) ? 強(qiáng)極性鍵合交聯(lián)固定相 ? 耐溶劑沖洗 ? 較低的20oC 溫度下限是任何鍵合PEG 固定相的最低溫度;改善低沸點(diǎn)分析物的分離度 ? 使用溫度:-40至230℃ ?類似于:HP-INNOWax,DB-WAXetr,DB-WAX,Rtx-WAX,Stabilwax,CP-Wax 52 CB,BP-20 ? 近似等同于USP 固定相G16 ? 應(yīng)用:可分析低沸點(diǎn)溶劑,TVOC,醇類,脂肪酸,香精類,溶劑,水樣
長(zhǎng)度內(nèi)徑膜厚規(guī)格貨號(hào)價(jià)格操作15m0.25mm0.25μm15m0.25mm0.25μm0507071270.00購(gòu)買15m0.25mm0.33μm15m0.25mm0.33μm0507081270.00購(gòu)買15m0.25mm0.50μm15m0.25mm0.50μm0507101270.00購(gòu)買15m0.32mm0.25μm15m0.32mm0.25μm0508071270.00購(gòu)買15m0.32mm0.50μm15m0.32mm0.50μm0508101270.00購(gòu)買30m0.25mm0.25μm30m0.25mm0.25μm0807071670.00購(gòu)買30m0.25mm0.33μm30m0.25mm0.33μm0807081670.00購(gòu)買30m0.25mm0.50μm30m0.25mm0.50μm0807101670.00購(gòu)買30m0.32mm0.25μm30m0.32mm0.25μm0808071670.00購(gòu)買30m0.32mm0.33μm30m0.32mm0.33μm0808081670.00購(gòu)買30m0.32mm0.50μm30m0.32mm0.50μm0808101670.00購(gòu)買50m0.25mm0.25μm50m0.25mm0.25μm1107072680.00購(gòu)買50m0.25mm0.33μm50m0.25mm0.33μm1107082680.00購(gòu)買50m0.25mm0.50μm50m0.25mm0.50μm1107102680.00購(gòu)買50m0.32mm0.25μm50m0.32mm0.25μm1108072680.00購(gòu)買50m0.32mm0.33μm50m0.32mm0.33μm1108082680.00購(gòu)買50m0.32mm0.50μm50m0.32mm0.50μm1108102680.00購(gòu)買60m0.25mm0.25μm60m0.25mm0.25μm1207073680.00購(gòu)買60m0.25mm0.33μm60m0.25mm0.33μm1207083680.00購(gòu)買60m0.25mm0.50μm60m0.25mm0.50μm1207103680.00購(gòu)買60m0.32mm0.25μm60m0.32mm0.25μm1208073680.00購(gòu)買60m0.32mm0.33μm60m0.32mm0.33μm1208083680.00購(gòu)買60m0.32mm0.50μm60m0.32mm0.50μm1208103680.00購(gòu)買15m0.53mm0.25μm15m0.53mm0.25μm0510071270.00購(gòu)買15m0.53mm0.50μm15m0.53mm0.50μm0510101270.00購(gòu)買30m0.53mm1.50μm30m0.53mm1.50μm0810143280.00購(gòu)買30m0.53mm0.33μm30m0.53mm0.33μm0810082270.00購(gòu)買30m0.53mm0.50μm30m0.53mm0.50μm0810102270.00購(gòu)買50m0.53mm0.25μm50m0.53mm0.25μm1110073980.00購(gòu)買50m0.53mm0.33μm50m0.53mm0.33μm1110083980.00購(gòu)買50m0.53mm0.50μm50m0.53mm0.50μm1110103980.00購(gòu)買60m0.53mm0.25μm60m0.53mm0.25μm1210074380.00購(gòu)買60m0.53mm0.33μm60m0.53mm0.33μm1210084380.00購(gòu)買60m0.45mm0.50μm60m0.45mm0.50μm1209104380.00購(gòu)買25m0.25mm0.25μm25m0.25mm0.25μm0707071380.00購(gòu)買30m0.25mm1.00μm30m0.25mm1.00μm0807121980.00購(gòu)買30m0.53mm1.00μm30m0.53mm1.00μm0810122270.00購(gòu)買50m0.32mm1.00μm50m0.32mm1.00μm115122680.00購(gòu)買60m0.32mm1.00μm60m0.32mm1.00μm125123680.00購(gòu)買30m0.32mm3.00μm30m0.32mm3.00μm085171980.00購(gòu)買30m0.32mm2.0μm30m0.32mm2.0μm0808151980.00購(gòu)買30m0.53mm2.0μm30m0.53mm2.0μm0810153280.00購(gòu)買25m0.25mm0.33μm25m0.25mm0.33μm0707081380.00購(gòu)買25m0.25mm0.50μm25m0.25mm0.50μm0707101380.00購(gòu)買25m0.25mm1.00μm25m0.25mm1.00μm0707121700.00購(gòu)買50m0.25mm1.00μm50m0.25mm1.00μm114122680.00購(gòu)買15m0.32mm0.33μm15m0.32mm0.33μm0508081270.00購(gòu)買15m0.32mm1.00μm15m0.32mm1.00μm0508121600.00購(gòu)買25m0.32mm0.25μm25m0.32mm0.25μm0708071380.00購(gòu)買25m0.32mm0.33μm25m0.32mm0.33μm0708081380.00購(gòu)買25m0.32mm0.50μm25m0.32mm0.50μm0708101380.00購(gòu)買25m0.32mm1.00μm25m0.32mm1.00μm0708121700.00購(gòu)買30m0.32mm1.00μm30m0.32mm1.00μm0808121980.00購(gòu)買15m0.53mm1.00μm15m0.53mm1.00μm0510121270.00購(gòu)買15m0.53mm2.65μm15m0.53mm2.65μm0510161580.00購(gòu)買25m0.53mm1.00μm25m0.53mm1.00μm0710121930.00購(gòu)買30m0.53mm2.65μm30m0.53mm2.65μm0810163280.00購(gòu)買30m0.53mm3.00μm30m0.53mm3.00μm0810173280.00購(gòu)買50m0.53mm1.00μm50m0.53mm1.00μm1110123980.00購(gòu)買50m0.53mm3.00μm50m0.53mm3.00μm1110174380.00購(gòu)買60m0.53mm5.00μm60m0.53mm5.00μm1210195680.00購(gòu)買20m0.32mm0.33μm20m0.32mm0.33μm1908081380.00購(gòu)買30m0.32mm1.80μm30m0.32mm1.80μm0808271980.00購(gòu)買30m0.53mm1.20μm30m0.53mm1.20μm0810463280.00購(gòu)買30m0.53mm0.25μm30m0.53mm0.25μm0810072270.00購(gòu)買20m0.32mm0.30μm20m0.32mm0.30μm1908031380.00購(gòu)買60m0.25mm0.20μm60m0.25mm0.20μm1207053680.00購(gòu)買50m0.25mm0.20μm50m0.25mm0.20μm1107052680.00購(gòu)買? 聚乙二醇(PEG) ? 強(qiáng)極性鍵合交聯(lián)固定相 ? 耐溶劑沖洗 ? 較低的20oC 溫度下限是任何鍵合PEG 固定相的最低溫度;改善低沸點(diǎn)分析物的分離度 ? 使用溫度:-40至230℃ ?類似于:HP-INNOWax,DB-WAXetr,DB-WAX,Rtx-WAX,Stabilwax,CP-Wax 52 CB,BP-2閱讀全文查看
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匿名 學(xué)習(xí)了教材保留值 保留值是組分在色譜體系中的保留行為,反映組分與固定相作用力的大小,是色譜過(guò)程熱力學(xué)特性的參數(shù),有如下幾種表示方式。
1.比移值
比移值(Rf)是溶質(zhì)移動(dòng)距離與流動(dòng)相移動(dòng)距離之比,是平面色譜的基本定性參數(shù)[圖7-1-1(a)]。為展開(kāi)后的平面色譜示意圖,Rf值以下式表示,見(jiàn)圖7-1-1(a)。
因此,當(dāng)Rf值為0時(shí),表示組分留在原點(diǎn)未被展開(kāi),當(dāng)Rf值為1時(shí),表示組分隨展開(kāi)劑至前沿,即組分不被固定相吸附,所以Rf值只能在0-1之間,故均為小數(shù)。
2.高比移值
為了避免Rf值為小數(shù),有些文獻(xiàn)以高比移值(hRf)代替Rf值來(lái)作薄層色譜的定性參數(shù),Rf×100即為hRf值,故hRf值都是在Rf之間。
3.相對(duì)比移值
相對(duì)比移值(Ri,s)是由于影響被分離物質(zhì)在薄層上移動(dòng)距離的因素較多,因此Rf值的重現(xiàn)性較差,如果將被分離物質(zhì)與一參比物點(diǎn)在同一塊薄層上,用相同的色譜條件進(jìn)行分離,相對(duì)比移值就是被分離物質(zhì)(s)和參比物(i)的Rf值之比,或是被分離物質(zhì)(s)和參比物i在薄層上移動(dòng)距離之比,見(jiàn)圖7-1-1(b)。由于參比物的Rf值或移動(dòng)距離可大于或小于被分離物質(zhì)的Rf值或移動(dòng)距離,因此相對(duì)比移值可大于或小于1,但其重復(fù)性及可比性均優(yōu)于Rf值。相對(duì)比移值以下式表示:
4.保留常數(shù)值
保留常數(shù)值(Rm)與化合物的Rf值之間或與被分離化合物結(jié)構(gòu)之間存在下述關(guān)系:
因此利用上式,可以推測(cè)同系物的Rm值或鑒定同系物。
5.環(huán)形展開(kāi)比移值
在環(huán)形展開(kāi)時(shí)的比移值以Rfc或RRf表示,RfC
值為被分離物質(zhì)由原點(diǎn)移動(dòng)的半徑與展開(kāi)劑由原點(diǎn)移動(dòng)至前沿半徑的比值,由于在直線展開(kāi)時(shí)的移動(dòng)距離與環(huán)形展開(kāi)的半徑的平方根
相當(dāng),因此環(huán)形展開(kāi)適用于Rf值小的化合物,而且原點(diǎn)最好離環(huán)心盡量近些,這樣展開(kāi)后的斑點(diǎn)集中、分離度好。
如果實(shí)驗(yàn)條件完全一致,比移值應(yīng)該是組分的定性技術(shù)參數(shù),但事實(shí)上由于影響平面色譜的因素很多,故Rf、hRf、Ri,s及Rm都不是一個(gè)穩(wěn)定的數(shù)值,只有在已知對(duì)照品隨行并用不止一種展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi)后,被分離組分的比移值與對(duì)照品完全一致時(shí),才可作為定性指標(biāo)之一。 保留值是組分在色譜體系中的保留行為,反映組分與固定相作用力的大小,是色譜過(guò)程熱力學(xué)特性的參數(shù),有如下幾種表示方式。1.比移值 比移值(Rf)是溶質(zhì)移動(dòng)距離與流動(dòng)相移動(dòng)距離之比,是平面色譜的基本定性參數(shù)[圖7-1-1(a)]。為展開(kāi)后的平面色譜示意圖,Rf值以下式表示閱讀全文
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匿名 查看了產(chǎn)品ZORBAX SB-C18
在低pH 條件下的(低達(dá)pH 1)分離時(shí),具有最長(zhǎng)的色譜柱壽命和最佳的重現(xiàn)性
專利的穩(wěn)定色譜柱化學(xué)允許在高溫和低pH 條件下使用,而不會(huì)降解
六種不同的鍵合固定相提供了廣泛的選擇性- SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、SB-C3
和SB-Aq
高純度(B 型)硅膠可獲得良好峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱使用專利的、獨(dú)特的、單官能團(tuán)硅烷,其具有較大的二異
丁基(SB-C18) 或二異丙基(SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SB-CN 和SB-Aq)側(cè)鏈基團(tuán),空間
位阻關(guān)鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面,以避免在低pH 條件下水解破壞。為了在酸性流動(dòng)相條件
下提供良好的穩(wěn)定性并使壽命最長(zhǎng),重現(xiàn)性最佳,StableBond 填料不封端。高純度、低酸度
的硅膠為酸性、堿性和中性化合物提供了出色的峰形,因此使得StableBond 色譜柱成為低pH
方法開(kāi)發(fā)的首選。ZORBAX StableBond 色譜柱可與所有常用流動(dòng)相兼容,包括水含量很高的
流動(dòng)相。
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匿名 學(xué)習(xí)了教材強(qiáng)健性(Robustness)15.9 強(qiáng)健性(Robustness) 國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)[6]已將分析步驟的強(qiáng)健性定義為“方法被微小的、但有意的參數(shù)改變對(duì)結(jié)果影響的承受能力"。一種良好的辦法為系統(tǒng)地改變方法中的重要參數(shù),然后測(cè)定它們對(duì)分離的影響。例如,如果一個(gè)方法使用36% ACN/水作流動(dòng)相,那么用33、36與39% ACN/水進(jìn)行分析,測(cè)定流動(dòng)相對(duì)保留值和選擇性的影響,則有助于確定有機(jī)溶劑含量比例變化對(duì)該方法的影響力。應(yīng)對(duì)所有變量(如流動(dòng)相添加劑、柱溫、流速等;見(jiàn)圖l-5所示)進(jìn)行類似的研究。如果像第6—9章所推薦進(jìn)行分離變量的系統(tǒng)研究,恨多數(shù)據(jù)可在方法建立過(guò)程中獲得。在定義強(qiáng)健性時(shí),使用參數(shù)作圖步驟特別有效(見(jiàn)10.6節(jié))。 強(qiáng)健性最重要的方面是建立能預(yù)測(cè)分離參數(shù)變化對(duì)結(jié)果影響的方法。例如兩組分在pH 3.0和pH 4.5時(shí)的分離相當(dāng),但在pH 3.O時(shí),pH變化±0.1,分離的變化則很大(而pH 4.5時(shí)則不大),那么選擇pH 4.5就較好??疾旆椒◤?qiáng)健性的有效辦法是用統(tǒng)計(jì)學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),同時(shí)評(píng)估多個(gè)參數(shù)。適宜的設(shè)計(jì)方案能夠最大限度地減少所需實(shí)驗(yàn)的次數(shù),并仍能提供有關(guān)各個(gè)參數(shù)影響結(jié)果的信息。一般首先應(yīng)對(duì)可能影響方法的所有已知因素或懷疑因素進(jìn)行多變量篩選研究。在第一步研究中,簡(jiǎn)明地檢查懷疑因素,以確定哪些因素對(duì)本方法的影響較大。首次研究的結(jié)果將表明只有這些因素重要。第二步是對(duì)這些重要因素進(jìn)行更詳細(xì)地評(píng)估,~般對(duì)每個(gè)因素部用三水平實(shí)驗(yàn)。該研究結(jié)果能給出每個(gè)因素對(duì)定量的影響。在方法建立中運(yùn)用實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)超出了本書的范圍,不過(guò),有關(guān)一般實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的詳情可以參見(jiàn)文獻(xiàn)14~17。另外,應(yīng)用計(jì)算機(jī)模擬(如Dry-Lab)對(duì)測(cè)定方法的強(qiáng)健性影響也很有用(見(jiàn)10.2和10_6節(jié))。 注意上述的考慮將大大改善最終方法的質(zhì)量。然而色譜柱是個(gè)例外。不同生產(chǎn)批號(hào)的色譜柱有可能使所有樣品成分的保留值不能重現(xiàn),甚至使分離結(jié)果不可接受。因此,在方法建立和論證過(guò)程中,至少應(yīng)對(duì)三個(gè)不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行評(píng)估,確保能得到重現(xiàn)性好的色譜柱,這一點(diǎn)十分重要。如果發(fā)現(xiàn)樣品保留值有明顯的批次差異時(shí),應(yīng)采取適當(dāng)?shù)拇胧员苊鈱?lái)發(fā)生問(wèn)題o一種方法是儲(chǔ)存足夠的“好”批號(hào)的色譜柱,以備將來(lái)該方法使用。另一種方法是測(cè)定是否能通過(guò)微小地改變色譜條件(%B、溫度、pH等),減少或糾正批次間保留值的任何不良變化。
15.9 強(qiáng)健性(Robustness) 國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)[6]已將分析步驟的強(qiáng)健性定義為“方法被微小的、但有意的參數(shù)改變對(duì)結(jié)果影響的承受能力"。一種良好的辦法為系統(tǒng)地改變方法中的重要參數(shù),然后測(cè)定它們對(duì)分離的影響。例如,如果一個(gè)方法使用36% ACN/水作流動(dòng)相,那么用33、36與39% ACN閱讀全文
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匿名 查看了產(chǎn)品Sephadex G-25
葡聚糖系類凝膠柱,操作范圍pH值:2-13,短時(shí)清洗范圍pH值:2-13,主要用于脫鹽及交換緩沖液,去除小分子雜質(zhì)。
葡聚糖系類凝膠柱,操作范圍pH值:2-13,短時(shí)清洗范圍pH值:2-13,主要用于脫鹽及交換緩沖液,去除小分子雜質(zhì)。 閱讀全文查看
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匿名 學(xué)習(xí)了教材色譜峰不對(duì)稱性(拖尾因子)
理想狀態(tài)下,所有的色譜峰應(yīng)該是對(duì)稱的(呈高斯?fàn)顟B(tài)分布)。
但是由于儀器系統(tǒng)死體積的存在,以及儀器部件和固定液對(duì)樣品的吸附效果,導(dǎo)致色譜峰經(jīng)常出現(xiàn)“前伸”和“拖尾”的情況。
拖尾是指如圖所示的色譜峰尾部(圖中B)比前部的距離大。
前伸與拖尾情況相反,是指色譜圖中色譜峰前部(圖中A)比尾部距離大。
因?yàn)椴粚?duì)稱的色譜峰導(dǎo)致在測(cè)量色譜峰面積時(shí)重復(fù)性和準(zhǔn)確度較差,所以會(huì)導(dǎo)致分離和定量方面出現(xiàn)問(wèn)題。
通常情況下,定量分析時(shí),對(duì)色譜峰的不對(duì)稱性預(yù)設(shè)一個(gè)數(shù)值,當(dāng)不對(duì)稱性超過(guò)這個(gè)數(shù)值時(shí),就可以認(rèn)為結(jié)果不可靠,不能采用。
理想狀態(tài)下,所有的色譜峰應(yīng)該是對(duì)稱的(呈高斯?fàn)顟B(tài)分布)。 但是由于儀器系統(tǒng)死體積的存在,以及儀器部件和固定液對(duì)樣品的吸附效果,導(dǎo)致色譜峰經(jīng)常出現(xiàn)“前伸”和“拖尾”的情況。 拖尾是指如圖所示的色譜峰尾部(圖中B)比前部的距離大。 前伸與拖尾情況相反,是指色譜圖中色譜峰前部(圖中A)比尾部距離大。 因?yàn)椴粚?duì)稱的色譜閱讀全文查看
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李飛 回答了問(wèn)題氣相色譜如何選擇試樣的溶劑?
在選擇的時(shí)候首先具有良好的溶解性和與目標(biāo)物質(zhì)的良好分離性能。檢測(cè)器、柱子有特殊要求的亦要考慮,對(duì)于峰形,您應(yīng)該考慮目標(biāo)的濃度。——預(yù)處理方法——注入量——調(diào)整信號(hào)衰減和其他因素。通常色譜柱對(duì)水敏感并會(huì)損壞色譜柱,因此盡量不要含水。此外,為了不干擾測(cè)量,通常溶劑具有較低的沸點(diǎn),并且峰值位于前面。使用得多的是正己烷,沸點(diǎn)較低的溶劑如氯仿,丙酮,正己烷等。甲醇和水是不利的色譜柱的使用壽命。
在選擇的時(shí)候首先具有良好的溶解性和與目標(biāo)物質(zhì)的良好分離性能。檢測(cè)器、柱子有特殊要求的亦要考慮,對(duì)于峰形,您應(yīng)該考慮目標(biāo)的濃度?!A(yù)處理方法——注入量——調(diào)整信號(hào)衰減和其他因素。通常色譜柱對(duì)水敏感并會(huì)損壞色譜柱,因此盡量不要含水。此外,為了不干擾測(cè)量,通常溶劑具有較低的沸點(diǎn),并且峰值位于前面。使用得多的是正己烷,沸點(diǎn)較低的溶劑如氯仿,丙酮閱讀全文0
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匿名 查看了產(chǎn)品GDX-102
GDX-102 的詳細(xì)資料如下:
名稱
組成
顏色
堆密度/g·ml-1
比表面
極性
最高使用溫度/℃
主要分析用途
/m2·g-1
GDX-102
二乙烯苯、苯乙烯等共聚物
白
0.2
680
非極性
270
高沸點(diǎn)物質(zhì)
長(zhǎng)度外徑目數(shù)材質(zhì)規(guī)格貨號(hào)價(jià)格操作2m3mm60-80目不銹鋼2m3mm60-80目不銹鋼0020-04030302780.00購(gòu)買2m3mm80-100目不銹鋼2m3mm80-100目不銹鋼0020-04030402780.00購(gòu)買2m4mm60-80目不銹鋼2m4mm60-80目不銹鋼0020-04050302880.00購(gòu)買2m4mm80-100目不銹鋼2m4mm80-100目不銹鋼0020-04050402880.00購(gòu)買3m3mm60-80目不銹鋼3m3mm60-80目不銹鋼0020-050303021080.00購(gòu)買3m3mm80-100目不銹鋼3m3mm80-100目不銹鋼0020-050304021080.00購(gòu)買3m4mm80-100目不銹鋼3m4mm80-100目不銹鋼0020-050504021230.00購(gòu)買1m3mm80-100目不銹鋼1m3mm80-100目不銹鋼0020-0303042500.00購(gòu)買3m4mm60-80目不銹鋼3m4mm60-80目不銹鋼0020-050503021230.00購(gòu)買4m3mm60-80目不銹鋼4m3mm60-80目不銹鋼0020-070303021480.00購(gòu)買4m3mm80-100目不銹鋼4m3mm80-100目不銹鋼0020-070304021480.00購(gòu)買4m4mm60-80目不銹鋼4m4mm60-80目不銹鋼0020-070503021680.00購(gòu)買4m4mm80-100目不銹鋼4m4mm80-100目不銹鋼0020-070504021680.00購(gòu)買5m3mm60-80目不銹鋼5m3mm60-80目不銹鋼0020-080303021880.00購(gòu)買5m3mm80-100目不銹鋼5m3mm80-100目不銹鋼0020-080304021880.00購(gòu)買5m4mm60-80目不銹鋼5m4mm60-80目不銹鋼0020-08050321530.00購(gòu)買5m4mm80-100目不銹鋼5m4mm80-100目不銹鋼0020-08050421530.00購(gòu)買6m3mm60-80目不銹鋼6m3mm60-80目不銹鋼0020-090303022100.00購(gòu)買6m3mm80-100目不銹鋼6m3mm80-100目不銹鋼0020-090304022100.00購(gòu)買6m4mm60-80目不銹鋼6m4mm60-80目不銹鋼0020-090503022400.00購(gòu)買6m4mm80-100目不銹鋼6m4mm80-100目不銹鋼0020-090504022400.00購(gòu)買2m3mm60-80目玻璃2m3mm60-80目玻璃0020-04030311080.00購(gòu)買2m3mm80-100目玻璃2m3mm80-100目玻璃0020-04030411080.00購(gòu)買2m4mm60-80目玻璃2m4mm60-80目玻璃0020-04050311180.00購(gòu)買2m4mm80-100目玻璃2m4mm80-100目玻璃0020-04050411180.00購(gòu)買3m3mm60-80目玻璃3m3mm60-80目玻璃0020-05030311380.00購(gòu)買3m3mm80-100目玻璃3m3mm80-100目玻璃0020-05030411380.00購(gòu)買3m4mm80-100目玻璃3m4mm80-100目玻璃0020-05050411530.00購(gòu)買3m4mm60-80目玻璃3m4mm60-80目玻璃0020-05050311530.00購(gòu)買2m3.2mm60-80目不銹鋼2m3.2mm60-80目不銹鋼0020-04040302850.00購(gòu)買2m3mm80-100目島津不銹鋼2m3mm80-100目島津不銹鋼0020-04030403980.00購(gòu)買3m4mm60-80目島津不銹鋼3m4mm60-80目島津不銹鋼0020-050503031430.00購(gòu)買2m3.2mm60-80目鈍化不銹鋼2m3.2mm60-80目鈍化不銹鋼0020-04040351050.00購(gòu)買4m3.2mm60-80目鈍化不銹鋼4m3.2mm60-80目鈍化不銹鋼0020-07040351820.00購(gòu)買2m3mm60-80目島津不銹鋼2m3mm60-80目島津不銹鋼0020-04030303980.00購(gòu)買2m1/16英寸60-80目不銹鋼2m1/16英寸60-80目不銹鋼0020-040903021280.00購(gòu)買GDX-102 的詳細(xì)資料如下:名稱組成顏色堆密度/g·ml-1比表面極性最高使用溫度/℃主要分析用途/m2·g-1GDX-102二乙烯苯、苯乙烯等共聚物白0.2680非極性270高沸點(diǎn)物質(zhì) 長(zhǎng)度外徑目數(shù)材質(zhì)規(guī)格貨號(hào)價(jià)格操作2m3mm60-80目不銹鋼2m3mm60-80目不銹鋼0020-04030302780.00購(gòu)買2m3m閱讀全文
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匿名 學(xué)習(xí)了教材尺寸排阻色譜法11.4 尺寸排阻色譜法 尺寸排阻色譜法(SEC)以水緩沖液為流動(dòng)相,常被稱作凝膠滲濾色譜法oSEC廣泛用于生物大分子,尤其是蛋白質(zhì)的分離和表征鑒定。與本書中討論的其它HPLC模式不同,這種分離模式要求吸附到固定相上的樣品分子應(yīng)盡可能少。這由于兩個(gè)重要原因:(I)SEC是使樣品變性、同收率降低可能性最小的HPLC方法;(2)系統(tǒng)方法建立要比RPC、JEC或HIC都簡(jiǎn)單(或有很大不同)。鑒于這些原因,我們?cè)诒竟?jié)中簡(jiǎn)單討論SEC,僅強(qiáng)調(diào)其通用性而非具體應(yīng)用。詳情可見(jiàn)文獻(xiàn)5,8. 61和62。11.4.1 SEC保留的基礎(chǔ) 圖II - 22a為樣品分子大小和柱填料子L徑對(duì)SEC保留的影響示意圖o(a)圖中填料的孔徑以微粒基質(zhì)(斜線陰影區(qū)域)間的空白區(qū)域表示。實(shí)心球分別表示兩種不同的樣品分子。較大的球形分子無(wú)法進(jìn)入填料孔內(nèi),稱作被填料排阻。而小分子則能夠進(jìn)入到網(wǎng)扎內(nèi),因此在流動(dòng)相中需多停留一段時(shí)間,保留值較大。 圖11 - 22 6為樣品分子大小不同的SEC保留機(jī)理示意圖。本例中,二分子均足夠小,都能進(jìn)入到填料孔中,但即使如此,由于小分子進(jìn)出較多,保留傾向較大。樣品分子在流動(dòng)相與色譜柱填料之間的分配決定于能夠進(jìn)到兩相中的有效分子中心的體積。在柱填料中的該體積越大,保留值就越大。小分子的中心能更貼近孔邊緣,所“有效體積較大。圖11 - 22b中的二分子的有效體積分別以微孔內(nèi)部的虛線表示。小分子在固定相中有較大的有效體積,填料內(nèi)部的這種分子相對(duì)較多,因此小分子比大分子晚流出色譜柱。 SEC的分離決定于(I)與分子大小有關(guān)的保留值,(2)柱效與峰寬。如圖11 - 22所示,保留值與分子的大小和柱填料的孔徑有關(guān)。這一關(guān)系可用樣品的對(duì)數(shù)分子量與保留時(shí)間或(更好是)保留體積作圖表示。圖11 - 23a所示為一假想的校正曲線。分子量大子某值(本圖中約10,)的樣品分子完全被排除于填料微孔之外,其保留體積VR=Vo(等于色譜柱內(nèi)微粒間的體積)。而分子量小于某值(本圖中約103)的分子則可完全進(jìn)入到微孔中(完全滲透),保留體積( Vo+V)=Vm。(a)下面的色譜圖說(shuō)明了這種關(guān)系。C峰的保留體積為vo(完全排阻),而且任何分子量大于105的化合物都將與c組分峰重疊在一起,(即排阻于填料之外的組分,不可能彼此分開(kāi))o同樣,F(xiàn)峰保留時(shí)間為(%+V),所有分子量小于103 的化合物都將與F峰重疊。圖Il - 23a中的D和E化合物具有不I司的分子量和不同的保留體積,因而能根據(jù)分子大小被分離。在排阻與完全滲透之間的分子量范圍(圖11 - 23 n中為l0%5-105)可作為該色譜柱填料的分級(jí)范圍。 建立SEC方法時(shí),應(yīng)選擇分級(jí)范圍能覆蓋所有樣品組分分子量的色譜柱。圖ll - 23 b給出了幾種SEC色譜柱的分級(jí)范圍(葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品作樣品)。小孔填料(12sA)分級(jí)范圍約為200—2×104,而大孔填料(l000A)有約105至更大(≈107)的范圍。SEC柱供貨商一般提供所售色譜柱的校正曲線。 圖11 - 23 c和d所示為在兩支孔徑分別為2soA和450A的色譜柱上,以數(shù)種蛋白為樣品得到的校正曲線??招膱A為采用蛋白不變性的流動(dòng)相的結(jié)果,實(shí)心圓為變性流動(dòng)相的結(jié)果。得到的分級(jí)范圍為: 在蛋白不變性條件下,分子量高達(dá)4百萬(wàn)道爾頓的蛋白質(zhì)可以在孔徑450A色譜柱上分離。但采用使蛋白變性的流動(dòng)相(6M鹽酸胍)可使這些蛋白結(jié)構(gòu)展開(kāi),增加了它們?cè)赟EC分離中的有效尺寸(溶質(zhì)流體動(dòng)力學(xué)直徑)o從圖11 - 23 c和d的曲線離散情況看,SEC保留與分子量的關(guān)系的規(guī)律性不很好。除11.4.4節(jié)中討論的“非理想”影響外,由SEC保留值推斷的分子表觀大小不僅與分子量有關(guān),也與分子的形狀有關(guān)。因此,由于葡聚糖分子的形狀(線性)與天然蛋白質(zhì)分子的形狀(球形)不一樣,葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品的校正曲線與天然蛋白(色譜柱相同)不同。有關(guān)保留值與分子形狀的深入討論,請(qǐng)參閱文獻(xiàn)61和64。 圖11 - 24所示為填料子L徑對(duì)SEC分離四種分子量不同的蛋白混合物的影響。在小孔徑Sephacryl S- IOOHR上分離時(shí)(a),158 -和440 - kDa蛋白在近%處流出(排阻作用),分離度不好。在大孔S一500HR填料上的分離時(shí)(c),所有譜峰移向全滲透,三種大蛋白質(zhì)的譜峰重疊在一起。而用中間孔徑尺寸的填料S一300HR則使該樣品很好地分離,甚至包括大分子量的雜質(zhì)I也得以分離。.『1.4.2應(yīng)用 SEC被認(rèn)為是一種分辨率不高的HPLC方法,因?yàn)樯V圖中的所有譜峰必須落在一個(gè)狹窄的保留范圍內(nèi)[ Vo VH Vo+v,)]。在SEC分離中通??床坏轿?、六個(gè)以上的峰達(dá)到基線分離的情況。因而,SEC用于分析復(fù)雜的生物樣品不多,需用IEC,尤其是RPC作日常分離。SEC通常應(yīng)用于下列領(lǐng)域: 1預(yù)分離復(fù)雜樣品,然后再使用高分辨率的HPLC方法(IEC、HIC、RPC等)分離或純化蛋白質(zhì)2分析純化蛋白質(zhì)樣品,以確認(rèn)二聚體、三聚體或其它聚合種類的存在 3由校正曲線估計(jì)蛋白質(zhì)的分子量,如圖11 - 23 c和d圖II - 25a所示為SEC預(yù)處理來(lái)分離相關(guān)蛋白的示例。樣品為三種蛋白,F(xiàn)、HN和HN-。以SEC收集適宜的餾分,粗分需要的蛋白組分,然后再用IEC、HIC或RPC進(jìn)一步純化。 圖11 - 25 6所示為重組人生長(zhǎng)激素(thCH)降解產(chǎn)物的SEC分析。本例中,單元蛋白從二聚體及多聚體中很好分離出,可以估計(jì)蛋白質(zhì)聚集的程度。圖11 - 25c說(shuō)明高分辨率分離人血清樣品(虛線)和已知血中存在的幾種蛋白的色譜圖l~5。本分離中至少有6種成分被部分分離。11.4.3 SEC分離的優(yōu)選條件 SEC方法建立包括下列選擇: ·色譜填料:孔徑尺寸;鍵合硅膠與聚合物 ·流動(dòng)相 ·色譜柱條件 ·色譜柱尺寸 孔徑大小的選擇前面已討論過(guò)。如果開(kāi)始時(shí)孔徑尺寸選擇不當(dāng),在首次分離中即可確認(rèn)(如圖11 - 24a或c)。鍵合相硅膠填料的粒徑較小,其柱效比聚合物高得多D小尺寸的硅膠基質(zhì)填料與類似的瓊脂糖基質(zhì)填料及聚合物填料相比,在高流速條件下物理穩(wěn)定性更高,可減少樣品的分析時(shí)間,硅膠基質(zhì)填料是分析型SEC分離的首選。商品聚合物填料一般顆粒較大,用高pH流動(dòng)相時(shí)更穩(wěn)定,可能更適用于大規(guī)模的制備分離。由加锫穩(wěn)定的硅膠制成的SEC填料(Zorhax CF - 250,GF - 450)也可使用高達(dá)8.5的pHj23]。流動(dòng)相的選擇由兩方面因素決定:1.與蛋白樣品兼容.2.樣品與柱填料相互作用小。11.4.4全面討論后一種因素。一般說(shuō)來(lái)流動(dòng)相由0.1—0.2M水緩沖液制得。最佳pH隨色譜柱與樣品不同面異,大多數(shù)分離可在pH6—8范圍內(nèi)進(jìn)行。 色譜柱條件指:柱長(zhǎng),微粒大小和流速。一旦選定了滿意的柱填料孔徑,通過(guò)選擇流動(dòng)相組成使樣品一填料間的相互作用減至最小,那么進(jìn)一步改善SEC分離的唯一途徑是增加色譜柱效Ⅳ(增加柱長(zhǎng),減小微粒尺寸,降低流速;見(jiàn)2.3.3.2節(jié))。 SEC色譜柱尺寸的選擇與所限定的樣品保留值范圍有關(guān)(k O),這意味著其它因素相同時(shí),峰窄于其它的HPLC模式。窄峰易于檢測(cè),但也更易受(不理想的)柱外譜峰展寬因素的影響。因此,分析型SEC色譜柱通常的內(nèi)徑為0.8一1.Ocm,以增大所有峰的體積,盡量降低柱外效應(yīng)。用內(nèi)徑0.8~1.Ocm的色譜柱,多數(shù)情況流速為0.5—2ml/min。直徑大的色譜柱可用于大量樣品的制備分離。11.4.4 常見(jiàn)問(wèn)題與解決方案 SEC分離中最為嚴(yán)重的問(wèn)題由樣品與柱填料之間發(fā)生作用而引起。這些相互作用由硅膠基質(zhì)填料中存有硅羥基或疏水樣品一填料結(jié)合而產(chǎn)生。對(duì)SEC分離中硅羥基作用的影響見(jiàn)圖11 - 26的說(shuō)明。流動(dòng)相pH 5時(shí),硅羥基電離,柱填料帶負(fù)電;在SEC分離的一般條件下pH(6—8),這些電離的硅羥基能帶來(lái)兩種與電離樣品分于的作用:靜電排斥和IEC保留。當(dāng)樣品分子帶負(fù)電荷,流動(dòng)相中緩沖液濃度低時(shí),發(fā)生靜電排斥。因而,樣品受帶負(fù)電填料的孔穴的排斥。圖Il - 26a所示為一假想的樣品與填料之間無(wú)相互作用(排斥或吸引)的分離。如發(fā)生靜電排斥,分離情況變?yōu)閳D11 - 26 6。樣品組分靠近排阻位置被洗脫出,分離度較差。增大流動(dòng)相離于強(qiáng)度可中和這種排斥作用,使分離得到改善。另外,降低pH,即減少蛋白分子與色譜柱上的負(fù)電荷,也能降低靜電排斥,協(xié)助解決圖1 1- 26 b的問(wèn)題。 如蛋白分子帶正電,能通過(guò)離子交換保留于電離的硅羥基上。這一影響將導(dǎo)致較小蛋白流出較晚(k 0),如圖11 - 26c中所示。增加緩沖劑濃度和/或提高pH,以減少蛋白質(zhì)的正電荷,可減小離子交換保留。(c)分離實(shí)際上比(a)好,當(dāng)SEC中發(fā)生離子交換作用時(shí)情況常如此。最好還是避免這種作用。因?yàn)榉蛛x變得難以預(yù)測(cè),后面的譜峰可能會(huì)嚴(yán)重拖尾,樣品回收率也會(huì)受損。然而,利用蛋白吸引到帶反電荷的色譜柱填料上設(shè)計(jì)的IEC柱,分離應(yīng)更好。 因?yàn)闃悠放c柱填料之間的疏水作用,圖11 - 26 c中的SEC分離也可發(fā)生。這種情況下,增加緩沖劑濃度將使后面譜峰流出更慢,加劇該過(guò)程。在流動(dòng)相中加入5一IO%丙醇可減小疏水作用。11.4.5 蛋白折疊 由于得到重組蛋白已不再困難,近年來(lái)用SEC鑒別蛋白折疊模式與中間體的研究備受關(guān)注。圖11 - 27所示為在平衡變性條件下,SEC分離活性和變性溶菌酶的示例。SEC分辨折疊與變性多肽以及(偶然)折疊中間體的能力,能夠?qū)Φ鞍兹芤褐忻糠N組分的濃 11.4 尺寸排阻色譜法 尺寸排阻色譜法(SEC)以水緩沖液為流動(dòng)相,常被稱作凝膠滲濾色譜法oSEC廣泛用于生物大分子,尤其是蛋白質(zhì)的分離和表征鑒定。與本書中討論的其它HPLC模式不同,這種分離模式要求吸附到固定相上的樣品分子應(yīng)盡可能少。這由于兩個(gè)重要原因:(I)SEC是使樣品變性、同收率降低可能性最閱讀全文
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匿名 查看了產(chǎn)品RB-50+
50%苯基、50%的二甲基聚硅氧烷
通用型中等極性固定相
鍵合交聯(lián)固定相、可用溶劑沖洗
等同于USP固定相
相似固定相:DB-17、DB-17MS、HP-50+、RTX-50、ZB-50、CP-SIL24CB
應(yīng)用:藥物,除草劑,乙二醇等
具體案例:
1.冰片、麝香酮的分析檢測(cè)。
長(zhǎng)度內(nèi)徑膜厚規(guī)格貨號(hào)價(jià)格操作30m0.25mm0.25μm30m0.25mm0.25μm084072760.00購(gòu)買30m0.32mm0.25μm30m0.32mm0.25μm085073060.00購(gòu)買30m0.32mm1.00μm30m0.32mm1.00μm085123060.00購(gòu)買30m0.45mm0.25μm30m0.45mm0.25μm086074550.00購(gòu)買30m0.53mm0.33μm30m0.53mm0.33μm087084550.00購(gòu)買 50%苯基、50%的二甲基聚硅氧烷通用型中等極性固定相鍵合交聯(lián)固定相、可用溶劑沖洗等同于USP固定相相似固定相:DB-17、DB-17MS、HP-50+、RTX-50、ZB-50、CP-SIL24CB應(yīng)用:藥物,除草劑,乙二醇等具體案例:1.冰片、麝香酮的分析檢測(cè)。