傳代時PBS洗是很重要的一步，zui近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘，有些需要更長的時間，等到人正常肝細(xì)胞,human L02細(xì)胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷人正常肝細(xì)胞,human L02細(xì)胞，不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。

  傳代 ，復(fù)蘇，凍存，

 1.  從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。

 2.  從37℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液，混勻。

 3.  離心， 1 000 rpm，5 min。

 4.  棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

 5.  次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。xy-12532R   ARVCF精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體
xy-10162R   ALDH1乙醛脫氫酶1型抗體
xy-12954R   phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
xy-12955R   phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
xy-12956R   phospho-ABCA1 (Ser2054)磷酸化腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體
xy-12957R   phospho-Aconitase 1 (Ser138)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
xy-12958R   phospho-Aconitase 1 (Ser711)磷酸化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
xy-12952R   phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體
xy-8997R   Annexin VI膜粘連蛋白6抗體
xy-9401R   ANKRD42錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體
xy-7738R   Anillin胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體
xy-7697R   Adenovirus 5 E1A binding protein腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)
xy-2314R   APOA1載脂蛋白A1抗體
xy-4007R   ATG16L自噬相關(guān)蛋白16A抗體
xy-5201R   phospho-ATG4D(Ser15)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體
xy-5196R   Phospho-ATG4C(Ser451)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
xy-5197R   phospho-ATG7(Ser95)磷酸化自噬相關(guān)蛋白7抗體
xy-5198R   phospho-ATG16A(Ser287)磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體
xy-5199R   phospho-ATG9A(Ser735)磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體
xy-5202R   phospho-ATG4D(Ser341)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體
xy-5203R   phospho-ATG4D(Ser467)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4D抗體
xy-5210R   phospho-TEM8 (Tyr382)磷酸化腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體
xy-5207R   phospho-ATG4A(Ser100)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體
xy-5208R   phospho-ATG4C(Ser166)磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
xy-5206R   phospho-ATG16A(Ser213)磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A抗體
xy-5209R   phospho-AKT3 (Ser472)磷酸化蛋白激酶AKT3抗體
xy-5211R   phospho-ADRB2 (Ser261)磷酸化腎上腺素能受體β2抗體
xy-5214R   phospho-AQP2(Ser261)磷酸化水通道蛋白2抗體
xy-5204R   phospho-ATG3 (Tyr18)磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體
xy-4026R   ALDOB醛縮酶2抗體
xy-3975R   AMY2A胰腺α淀粉酶抗體
xy-7961R   ANKRD11錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體
xy-8440R   phospho-c-ABL1+2 (Tyr393+429)磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
xy-8449R   phospho-ATF2 (Thr53)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體