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人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞_美國(guó)ATCC-上海信裕生物工程有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):1098
核心提示:公司名稱: 上海信裕生物工程有限公司 產(chǎn)品參考價(jià): 200元 更新時(shí)間: 2018-05-23 05:10:55 所 在 地: 生產(chǎn)地址: 人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞,供應(yīng)國(guó)內(nèi)外各類細(xì)胞ATCC/ICLC、、、、、傳代細(xì)胞,原代細(xì)胞,耐藥株,本公司細(xì)胞僅提供科研使用,不用于臨床,提供細(xì)胞說(shuō)明書。 【詳細(xì)說(shuō)明】 細(xì)胞傳代 人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞1. 試驗(yàn)準(zhǔn)備:200 ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號(hào)筆,培養(yǎng)皿,離心管。2. 棄掉培養(yǎng)皿中
公司名稱: 上海信裕生物工程有限公司 產(chǎn)品參考價(jià): 200元 更新時(shí)間: 2018-05-23 05:10:55 所 在 地: 生產(chǎn)地址:
人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞,供應(yīng)國(guó)內(nèi)外各類細(xì)胞ATCC/ICLC、、、、、傳代細(xì)胞,原代細(xì)胞,耐藥株,本公司細(xì)胞僅提供科研使用,不用于臨床,提供細(xì)胞說(shuō)明書。 【詳細(xì)說(shuō)明】

細(xì)胞傳代  人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞

1.  試驗(yàn)準(zhǔn)備:200 ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號(hào)筆,培養(yǎng)皿,離心管。

2.  棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用1 ml的PBS溶液洗滌兩次。

3.  用Tip頭加入1 ml Trypsin液,消化1分鐘(37℃,5%CO2 )。人結(jié)腸癌細(xì)胞株 HT29細(xì)胞用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞完全從壁上脫落下來(lái)為止。

4.  加入1 ml的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5.  用Tip頭多次吹吸,使細(xì)胞完全分散開。

6.  將培養(yǎng)液裝入離心管中,1 000 rpm離心5 min。

7.  用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇0.8X106個(gè)細(xì)胞加入一個(gè)35mm培養(yǎng)皿。

8.  將合適體積完全培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。


傳代時(shí)消化的問(wèn)題:可以這樣說(shuō),對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好zui至關(guān)重要的考驗(yàn)。
很多人都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了,狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題,可以非??隙ǖ卣f(shuō),你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。
在消化的過(guò)程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。。。。,后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教。稱之為“四步消化法"。(以難消化細(xì)胞為例)xy-4901R   Annexin A7膜粘連蛋白7抗體
xy-9823R   C3orf153號(hào)染色體開放閱讀框15抗體
xy-6336R   APOB48R載脂蛋白B受體抗體
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關(guān)鍵詞: 抗體 蛋白 細(xì)胞 消化 受體
 
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