色譜柱是氣相色譜儀的關(guān)鍵部件,是分離樣品的重要部位。要得到一個(gè)很好的分析分離譜圖,主要是取決于固定相和柱溫的選擇。在氣-液色譜中固定相的選擇決定于固定液,擔(dān)體起支持體的作用,因此在氣-液色譜中,選擇合適的固定液很關(guān)鍵。一般可按照 相似相溶的原則
進(jìn)行選擇。即按分離組分的極性或官能團(tuán)與固定液相似的原則選擇,具體原則如下:(1)按極性選擇:這是一個(gè)較為容易的選擇,不多說明;(2)按官能團(tuán)選擇;用類似要分析化合物官能團(tuán)的固定液,如:酯類,則選擇酯或聚酯固定液;醇類則可選擇聚乙二醇等醇類固定液;(3)按重要差別:各組分的沸點(diǎn)是主要矛盾,則選擇非極性固定液;若極性為主要矛盾,要選擇極性固定液。由于分離的好壞還要決定于柱溫、載氣流速等許多因素,因此該原則僅作為固定液選擇的原則之一,也是對(duì)色譜柱選擇的最基本的要求。
在實(shí)際的操作中,應(yīng)注意色譜柱的填裝、老化、最高使用溫度、安裝等關(guān)鍵問題。填裝時(shí)要緊密而且中間不能有停頓,最好是固定相連續(xù)流下來填裝。老化時(shí)應(yīng)保持連續(xù)的老化,填充柱最好過夜,毛細(xì)管柱一般幾個(gè)小時(shí)就可以,而且最好在實(shí)際使用溫度上20~30℃再連續(xù)老化一段時(shí)間,運(yùn)用程序升溫進(jìn)行老化時(shí)要重復(fù)幾次,會(huì)得到更好的老化效果。在實(shí)際或老化時(shí)不宜長(zhǎng)時(shí)間在最高使用溫度下工作。老化時(shí)要十分注意:不要連接檢測(cè)器;確保有載氣通過;氫氣不能作為老化氣。一般情況下,新柱子、長(zhǎng)期不用的柱子、改變分離條件,均要進(jìn)行老化。安裝時(shí)不宜使填料與噴嘴下端距離太大,以略微有一定的空隙為宜。另外在安裝或拆卸時(shí)應(yīng)在室溫下操作,填充柱有卡套密封和墊片密封,卡套分三種:金屬卡套,塑料卡套,石墨卡套。安裝時(shí)不易擰的太緊,墊片式密封每次安裝色譜柱都要換新的墊片(島津色譜是墊片密封),并檢察色譜柱兩頭是否用玻璃棉塞好,防止玻璃棉和填料被載氣吹到檢測(cè)器中。一般毛細(xì)管色譜柱色譜柱入口端插入襯管錐口的一半距離,即色譜柱穿過密封墊露出大約6mm的頭,毛細(xì)管色譜柱安裝插入的長(zhǎng)度要根據(jù)儀器的說明書而定,不同的色譜氣化室結(jié)構(gòu)不同,所以插進(jìn)的長(zhǎng)度也不同。需要說明的如果操作人員沒有采用毛細(xì)管色譜柱分流,氣化室采用填充柱接口這時(shí)與氣化室連接毛細(xì)管柱不能探進(jìn)太多,略超出卡套即可。在進(jìn)行樣品的檢測(cè)時(shí)對(duì)柱子的柱效都有一定的要求,因此必須柱效保持和提高柱效,可采用如下的方法:(1)采用內(nèi)徑小的色譜柱;(2)減少液膜厚度;(3)使用更長(zhǎng)的色譜柱;(4)減少進(jìn)樣量;(5)采用程序升溫,以改善峰形;(6)采用適宜的載氣流速和適當(dāng)?shù)妮d氣類型。