大鼠凝血素（Prothrombin）試劑盒使用說明書    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠凝血素（Prothrombin）水平。用純化的大 鼠凝血素（Prothrombin）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入 凝血素（Prothrombin），再與 HRP 標記的凝血素（Prothrombin）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色。   1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能 馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀   2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50 l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40 l， 然后再加待測樣品 10 l（樣品最終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。 4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50 l，空白孔除外。 7. 溫育：操作同 3。 8. 洗滌：操作同 5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50 l，再加入顯色劑 B50 l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 15 分鐘. 10. 終止：每孔加終止液 50 l，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。