數(shù)字 PCR( digital PCR ,dPCR ) 技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)。原理是將一個(gè)PCR 反應(yīng)體系分配到大量微小的反應(yīng)單元中,在每個(gè)微反應(yīng)器中包含或不包含 1 個(gè)或多個(gè)拷貝的目標(biāo)核酸分子 (DNA 模板) ,進(jìn)行“單分子模板”PCR 擴(kuò)增。擴(kuò)增結(jié)束后,通過(guò)陽(yáng)性反應(yīng)單元( 通過(guò)終點(diǎn)熒光信號(hào)判斷) 的數(shù)目和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算原始樣本中目標(biāo)基因的拷貝數(shù)。無(wú)需依賴于對(duì)照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進(jìn)行精確的絕對(duì)定量檢測(cè)。
這種極其高靈敏的技術(shù)已經(jīng)證明了其在絕對(duì)定量,稀有事件檢測(cè),拷貝數(shù)變異(CNV),基因表達(dá)和miRNA定量等應(yīng)用中的可靠性。數(shù)字PCR正迅速成為實(shí)驗(yàn)室的主流技術(shù),從學(xué)術(shù)界到生物技術(shù),從制藥到工業(yè)。
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