凝膠電泳
在生物分析裏常常會(huì)遇到一個(gè)問題,要如何分離不同的DNA、RNA或蛋白質(zhì)呢?目前最常用來分離DNA、RNA或蛋白質(zhì)的方法稱為“凝膠電泳”,其中PFGE凝膠電泳可以用來分離DNA或RNA;SDS-PFGE凝膠電泳可以用來分離蛋白質(zhì)。
PFGE凝膠電泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis)
由于DNA或RNA含有磷酸根,所以帶負(fù)電荷,而且?guī)щ娏抗潭?,?dāng)我們外加電場,可以使DNA或RNA片段沿著電場的方向由左向右前進(jìn)
,凝膠為多孔性物質(zhì),DNA或RNA在凝膠中的移動(dòng)速度與分子大小成正比:
>DNA或RNA愈短,分子量愈小,質(zhì)量愈輕,移動(dòng)速度較快。
>DNA或RNA愈長,分子量愈大,質(zhì)量愈重,移動(dòng)速度較慢。
科學(xué)家將螢光劑與DNA或RNA結(jié)合,在紫外光照射時(shí)會(huì)發(fā)出很強(qiáng)的螢光,所以可以明顯分辨出不同大小的DNA片段,
最后可以在凝膠不同的位置上看到發(fā)光的條紋,結(jié)果只知道DNA片段共有6種不同的長度,卻不知道這6種DNA片段的A、T、G、C如何排列組合。