熒光顯微鏡檢查
經(jīng)熒光染色的標本應(yīng)當天鏡檢,不宜存放,熒光顯微鏡下觀察時
間也不宜太長,因熒光會逐漸消退。作油鏡檢查時,標本宜用無熒光
油和蓋玻片封埋。常用封埋劑為1 份pH9.0 0. 05mol/L碳酸鈉緩沖液
與9 份無熒光甘油混勻后即成。觀察標本的特異性熒光強度一般用+
號表示。
一表示無熒光;±為極弱的可疑熒光;+ 為熒光較弱但清楚可見
;2+為熒光明亮;3+-4+ 為熒光閃亮。臨床上根據(jù)特異性熒光強度達
2 + 以上判定為陽性,而對照管應(yīng)呈一或±。根據(jù)呈2+的血清最高稀
釋度判定特異性抗體效價。
在熒光顯微鏡檢查中,非特異性熒光染色是影響檢測結(jié)果的主要
問題。非特異性熒光染色可由于某些抗原的自發(fā)熒光及交叉反應(yīng)等多
種因素,可通過對照進行鑒別與排除。
有些則要通過對抗原的純化、抗體的提純、提高熒光抗體結(jié)合物
的比例等各方面,尋找原因逐項清除。
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