光學(xué)顯微鏡物鏡的分辨率與光的波長相關(guān)-光學(xué)原理
分辨率是物鏡所能分開的兩個點的最短距離。例如用某物鏡觀察時,能夠把距離為
0.5μm的兩個點分辨開,如果再近一點,如0.4μm時,此物鏡不能再分辨出來,看到象
是一個點。那么0.5μm就是此物鏡的分辨率。物鏡的分辨率就是顯微鏡的分辨率,目鏡與
是微鏡的分辨率無關(guān)。
物鏡的分辨率與光的波長有密切關(guān)系,根據(jù)光的衍射理論,可以求出物鏡的分辨率.
總的看來,數(shù)值孔徑(鏡口率)愈大,分辨率也愈高,物鏡的價值也就愈大。
因此數(shù)值孔徑是衡最顯微鏡質(zhì)量優(yōu)劣的主要依據(jù)。
景深是指在焦點所及范圍內(nèi)主題的最近部分到最遠(yuǎn)部分的距離。在顯微鏡中,
圖像的尺寸比標(biāo)本的要大得多,景深極短,以微米計。放大倍數(shù)愈大,數(shù)值孔徑越高,
景深就愈短,不同數(shù)值孔徑的干燥物鏡的景深近似位。景深是隨波長的減小而減小的。
這里只以綠光波長來計算。
非常明顯,表中數(shù)值孔徑高的物鏡其景深極小。用高數(shù)值孔徑的物鏡對一個像的焦點
要求很嚴(yán)格,只要輕輕一觸顯微鏡上焦點的微調(diào)就會造成像的焦點不準(zhǔn)。當(dāng)標(biāo)本厚度超過
所用物鏡的景深值時,則標(biāo)本內(nèi)就有些地方失焦,就會引起所通過的光彌散,影響顯微鏡
攝影所記錄的像的質(zhì)量。因此,標(biāo)本的厚度不要超過所用物鏡的有效景深。
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