不同光源設計和視野的熒光顯微鏡有什么特征
熒光顯微術可以是明視野,也可以是暗視野,既可以是透射式,也
可以是落射式以及這些方法的適當組合。一般暗視野方法產生的圖像的
反襯強,效果好,但不及明視野方便。
至于透射光和落射光,則落射光應用范圍更廣,不僅適用于觀察普
通標本,還可觀察不透明標本。
在一般顯微鏡的基礎上,大型熒光顯微鏡,它的光學系統(tǒng)和機械系
統(tǒng)是特為熒光鏡檢而設計的。它附有高壓和低壓兩個光源系統(tǒng)。
高壓光源有透射和落射兩種方式的激發(fā)光路,通過改變光路中的反
光鏡,可以進行透射熒光或落射熒光檢查。低壓光源的燈室與鏡座相連,
通過鏡座中的光路可作為普通透射鏡的觀察。
由于弧光燈或水銀燈除發(fā)生紫外光外,還發(fā)生大量的熱(紅外線)。
因此常使用吸熱裝置以吸去紅外線和部分紅光,以保護活細胞免受
傷害。
這種吸熱裝置過去常用10% 硫酸銅溶液,現在則使用隔熱玻璃。
固定技術應使胚盡快中止在所需研究的某個發(fā)育階段,而且不改變
共內部結構。然后通過逐漸提高酒精濃度的方法使材料逐漸脫水,最后
包埋在石蠟中,用切片機切片并染色使其顯示三維結構。
由于要研究胚胎發(fā)生的全過程,應固定不同時期發(fā)育的胚珠。一般
采用切片厚度為5 μm.作電鏡研究時采用戊二乙醛茶改良固定液及較硬
的環(huán)氧塑料包埋,這樣可使切片厚度降為0.5-1.0 μm 以下,這種切片
也可用作光學顯微鏡觀察。
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