光學(xué)切片和3D圖像

激光共焦熒光顯微鏡的特別之處在于能夠?qū)^厚樣品產(chǎn)生的聚焦圖
像進(jìn)行光學(xué)切片測試。這是與透射電子顯微鏡以及其他傳統(tǒng)的測試方法
相比的一個巨大優(yōu)勢。比如對于透射電子顯微鏡，其樣品必須制備成對
電子束透明，一些大體塊以及堅硬的材料，通常會借助金剛刀進(jìn)行切割
，但是這樣就破壞了材料本身。同樣透射電子顯微鏡也無法實(shí)現(xiàn)三維成
像。

一般熒光顯微鏡對于薄樣品可獲得清晰的圖像，但當(dāng)樣品較厚時，
物平面之外的熒光分子也會被激發(fā)，而這些光在像平面上是彌散的，因
而會干擾成像質(zhì)量。

只有對紫外和熒光透明的樣品才能獲得三維圖像。實(shí)際應(yīng)用中，即
使是透明的樣品，在激光共焦熒光顯微鏡下，當(dāng)對樣品較深的平面掃描
時，激光束的強(qiáng)度往往也會變得很弱。結(jié)果就是在這些區(qū)域的圖像較暗
。

二維圖像是從一個方向觀測樣品獲得的(比如從頂部)，它們并不能
提供其他視角的信息(比如頂部、底部、側(cè)面或斜面)。在得到樣品所有
不同層面的二維掃描圖像后，計算機(jī)軟件可以通過將不同層面的光學(xué)切
片整合起來從而精確地進(jìn)行三維圖像構(gòu)建。計算機(jī)強(qiáng)大的圖片和數(shù)字圖
像存儲使得三維重建過程簡單且快速。

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