物鏡
當(dāng)選擇物鏡時(shí),必須考慮其放大率和工作距離。工作距離是指當(dāng)所
觀察的標(biāo)本最清楚時(shí)物鏡的前端透鏡下表面到標(biāo)本蓋玻片上表面的距離
。換句話說(shuō),工作距離定義為物鏡不能進(jìn)去的“禁區(qū)”。如果一旦物鏡
進(jìn)入該區(qū)域,將會(huì)出現(xiàn)下面兩種情況:物鏡將會(huì)因?yàn)榻佑|到蓋玻片或者
是較硬樣品的表面而受到破壞;由于無(wú)法對(duì)焦造成圖像模糊。因此為了
確保物鏡安全,在操作時(shí)需要特別注意。
每一個(gè)熒光團(tuán)都有不同的光漂白特性。對(duì)于激光共焦熒光顯微鏡來(lái)
講,光漂白是最大的問(wèn)題,因此實(shí)際測(cè)試中需要考慮避免或減輕光漂白
程度。因此在激光共焦熒光顯微鏡測(cè)試中,需要選取合適的染料,該染
料可以在正常激光強(qiáng)度照射下最大程度減輕光漂白程度。當(dāng)具有光漂白
的染料用于測(cè)試中,以下三種方法可以降低光漂白程度:盡可能用低的
激光強(qiáng)度;盡可能降低照射的時(shí)間(實(shí)際測(cè)試中,盡快完成一次測(cè)試);
采用自由基清除體。
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