細(xì)胞生物學(xué)熒光顯微鏡免疫熒光技術(shù)立體分辨力
如同細(xì)胞生物學(xué)的所有其他領(lǐng)域一樣,研究細(xì)胞周期
的主要目的也是要闡明各細(xì)胞組分的功能以及與其他因子的相
互作用。應(yīng)用熒光顯微鏡,可使得對(duì)細(xì)胞周期中任何蛋白
質(zhì)的豐度及在亞細(xì)胞定位有所認(rèn)識(shí),并對(duì)理解它們的作用
提供重要信息。這一技術(shù)將熒光探針的靈敏性和光學(xué)顯微鏡
的立體分辨能力以及抗體的專一性結(jié)合了起來(lái)。由于每種熒光
探針都有其獨(dú)特的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng),因此可以對(duì)這些不同的
熒光探針進(jìn)行有選擇地檢側(cè)。籍助于選擇不同顏色的熒光生色
分子,就可以同時(shí)檢測(cè)一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的多種抗原.從而為比較它
們的相對(duì)空間和時(shí)間分布提供一個(gè)直接的途徑。
原理與應(yīng)用
在熒光顯微鏡技術(shù)中,多重標(biāo)記是區(qū)分體內(nèi)特定細(xì)胞過(guò)程
中各有關(guān)因子的有效方法。當(dāng)在體外檢側(cè)中,處理有高水平冗
余度的蛋白質(zhì)家族時(shí),這種方法有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn);如在周期蛋
白依賴性激醉家族和它們的周期蛋白配對(duì)物的例子里即如此。
應(yīng)用免疫熒光技術(shù)使得人們可以在整個(gè)細(xì)胞周期中跟蹤不同的
周期蛋白、周期蛋白依賴激酶或其他蛋白質(zhì)的表達(dá)和它們的亞
細(xì)胞定位;也可以與其他家族成員或潛在的結(jié)合物的分布進(jìn)行
比較。
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