配備相差顯微鏡高倍鏡觀察濃縮微生物數(shù)量樣品
制備濕片
實(shí)際上,釀酒師沒有時(shí)間從樣品中分離微生物后再進(jìn)行觀察,
如果配備一臺(tái)相差顯微鏡,樣品制成濕片后很容易觀察。一般來說
,顯微鏡能看清微生物的最低數(shù)量要求為104次方個(gè)/mL,因此,
應(yīng)該調(diào)整顯微鏡的視野和/或濃縮樣品,使微生物數(shù)量達(dá)到要求。
1.用接種環(huán)或者滴管,取一滴葡萄汁或葡萄酒于潔凈的載玻
片上。如果果汁或酒中的微生物數(shù)量比較低,可以采用不斷離心的
方法進(jìn)行濃縮。離心時(shí),用錐形離心管取10mL樣品,3000×g離心1
5min,離心后傾去上清液,玻棒攪勻沉淀物,然后用巴斯德滴管吸
取一滴沉淀物放置在玻片上。
2.放一個(gè)蓋玻片在吸取的液體上,做成濕片,然后分別用低
倍鏡和高倍鏡觀察。短期內(nèi)保存,可以用凡士林封住蓋玻片四周,
防止?jié)衿稍铩?2.6制備霉菌的玻片培養(yǎng)物
霉菌的鑒定主要依賴于形態(tài)學(xué)特征,霉菌的生長培養(yǎng)基對(duì)其形
態(tài)具有非常大的影響。如果霉菌生長雜亂無章,顯微鏡觀察起來也
很困難。制備濕片,對(duì)細(xì)菌和酵母菌來說意義不大,但對(duì)于霉菌,
它則是一個(gè)典型的培養(yǎng)方法,制作過程如下。濕片的優(yōu)點(diǎn)在于染色
后對(duì)微生物的機(jī)械損傷最小。
1.將A、B液等體積混合,配制乳酚一苯胺藍(lán)染料:
a.A液:將lOg苯酚與lOmL蒸餾水緩慢混合,完全溶解后,加
入10mL乳酸和10mL甘油;
b.B液:配制苯胺藍(lán)飽和溶液,取10mL染料,加入10mL甘油和
80mL蒸餾水。
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