研究的物種蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能生物電子顯微鏡

蛋白質(zhì)定性可能會(huì)包括結(jié)構(gòu)、功能和遺傳學(xué)的信息，要進(jìn)行這樣的

研究很可能會(huì)需要至少克級(jí)量的純蛋白質(zhì)。理想的純化應(yīng)當(dāng)步驟少
、每步的回收率高，然而，如果每步的回收率差( 50％)，應(yīng)當(dāng)有
一些指標(biāo)來表明是什么原因?qū)е铝嘶钚該p失，是因?yàn)樽非蠹兌榷鴣G

棄在其他組分中了，還是活性真的損失了。如果是后一種情況，終
產(chǎn)物的活性會(huì)低于總活性，盡管用標(biāo)準(zhǔn)分析會(huì)顯示很好的同質(zhì)性(h
omogeneity)。在每一步的回收率和純化效果之間的選擇會(huì)是一個(gè)
問題，取層析峰的一個(gè)窄截取(cut)峰會(huì)得到很純的組分，但是在
另一方面也損失了大量的較低純度的活性成分，在做這樣的抉擇時(shí)
，必須要遵循這樣的準(zhǔn)則：如果產(chǎn)量不重要，那么為了純度而選擇
低產(chǎn)量就合乎邏輯。

  蛋白質(zhì)純化的原料

  對(duì)于從事蛋白質(zhì)純化項(xiàng)目的許多人來說，原料是無法選擇的，
他們正在研究某一特定的生物組織或器官，目的是從這種原料中純
化某種蛋白質(zhì)，但是仍然可以找到一些稍簡(jiǎn)單的方法。例如，如果
很難得到大量的原料，最好先用易得原料的物種進(jìn)行試驗(yàn)，典型的
例子是：當(dāng)所研究的物種是人時(shí)，由于實(shí)際情況和(或)道德的原因
而不容易得到組織樣品。在這種情況下，通常到容易得到哺乳動(dòng)物

組織的地方(如屠宰場(chǎng))，使用牛、綿羊或豬的替代原料進(jìn)行試驗(yàn)，
一旦設(shè)計(jì)出一種從替代原料中純化蛋白質(zhì)的方案，那么要研制一種
從人原料中純化蛋白質(zhì)的方案就會(huì)容易得多——使用完全相同的方
法就會(huì)取得滿意的效果。在大約1億年(這是將大多數(shù)高等哺乳動(dòng)物
分類在一起的一個(gè)時(shí)間范圍)間分化的物種之間，蛋白質(zhì)含量的差
異十分微小，這樣，來源于不同動(dòng)物的蛋白質(zhì)用各種分級(jí)分離的方
法分離時(shí)，其分離行為很可能相似。如用豬的組織設(shè)計(jì)出的一種方
案很可能只需要進(jìn)行很小的修改就可以用在人的組織上。
  另外主要關(guān)注蛋白質(zhì)(特別是酶)的功能。在整個(gè)進(jìn)化過程中，
通常情況下，哪些功能和作用是十分保守的?在這種情況下，對(duì)可
能的原料來源進(jìn)行初步的篩選，最好也對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行初步的篩選，然
后再確定適合于研究目的的原料。

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