用于顯微熒光測(cè)量的儀器為顯微熒光分光光度計(jì)的應(yīng)用

用于顯微熒光測(cè)量的儀器為顯微熒光分光光度計(jì)(microspectrofluorimeters)

該儀器主要
為用于熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的定量而設(shè)計(jì)的?也可測(cè)量透射和反射
光譜。利用落射系統(tǒng)還可同時(shí)記錄熒光發(fā)射和在激發(fā)波長(zhǎng)的透射。
  顯微熒光測(cè)量時(shí)，未知物熒光與標(biāo)準(zhǔn)物熒光相比較才能精確定
量。
  熒光標(biāo)準(zhǔn)物的必要條件是：①與被測(cè)量的熒光體相同，或至少
是具有相等或相似熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的熒光體；②具有好的重復(fù)
性；③足夠的穩(wěn)定性。一個(gè)與蛋白結(jié)合的熒光色素的熒光特性與未
結(jié)合的熒光色素并不相同。
  所以，一個(gè)熒光色素的溶液可能不適合作為已結(jié)合熒光色素的
標(biāo)準(zhǔn)物。若無(wú)標(biāo)準(zhǔn)物，只能對(duì)不同實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行相對(duì)定量比較。
  顯微熒光測(cè)量在熒光標(biāo)記和免疫熒光標(biāo)記中應(yīng)用較多。神經(jīng)組
織中的兒茶酚胺、神經(jīng)通路的熒光標(biāo)記、酶、肽、蛋白質(zhì)的免疫細(xì)
胞化學(xué)等研究中均可采用顯微熒光測(cè)量方法進(jìn)行定量測(cè)定。近年來(lái)
應(yīng)用較多的流式細(xì)胞光度計(jì)也常采用熒光標(biāo)記測(cè)定方法。

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