相差顯微鏡術(shù)
使用校準(zhǔn)的明視野顯微鏡觀察盛于容器內(nèi)的典型的活細(xì)胞時(shí),
可觀察到微小的細(xì)節(jié)。折射率和標(biāo)本厚薄的差異都能轉(zhuǎn)換成明暗差
異。這就是所謂的相差顯微鏡,被廣泛用于活體和未著色標(biāo)本的觀
察。
在相差光學(xué)中,物鏡的后焦平面上有一個(gè)相差環(huán),聚光鏡的前
焦平面有一個(gè)環(huán)狀光闌。相差環(huán)和環(huán)狀光闌改變著因細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)產(chǎn)
生的衍射的振幅和相態(tài)關(guān)系,在與非衍射光產(chǎn)生的干涉對(duì)比下,就
形成了相差。相差產(chǎn)生了一種多種明暗分層的圖像。折射率較高的
正相差區(qū),如胞漿里的線粒體、原生質(zhì)體內(nèi)的核仁都顯得著色較深
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