暗視野顯微鏡術(shù)
暗視野顯微鏡術(shù)可用于微小活體生物的研究,比如螺旋菌、原
生動物、酵母菌及未染色的組織和細胞。在明視野顯微術(shù)中,給標
本染色可以使其產(chǎn)生充分的對比度,這樣衍射才得以發(fā)生,因此用
染色來顯示標本的細節(jié),就是使生物標本產(chǎn)生一些人為的改變;同
樣在固定染色前需要殺死細胞。因此,暗視野顯微鏡術(shù)和相差顯微
鏡術(shù)一樣,對研究活體標本是非常有用的。通過暗視野顯微鏡術(shù),
透明的物體與其周圍培養(yǎng)基可產(chǎn)生足夠的對比度從而得到可識別的
物體的像。通過這樣一個傾斜的角度照亮物體,可使正常通過樣本
的強烈的光射線和直接射進物鏡的光(照亮整個視野的光),均直接
通過物鏡,這就產(chǎn)生了一個暗視野,但是暗背景和被樣本分散了的
衍射光產(chǎn)生的對比度使樣本在暗背景的襯托下顯得清晰可視、明亮
有光澤。
雖然明場聚光鏡可以被調(diào)出一個適宜的暗視野,但專門的聚光
鏡可以更有效地產(chǎn)生必要的空心光錐。
使用暗視野技術(shù)時,需要極度干凈的載玻片、蓋玻片、浸入介
質(zhì)。氣泡、灰塵,或者任何外來雜質(zhì)都將發(fā)生折射,從而影響樣本
的圖像。
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