細(xì)胞培養(yǎng)的無菌技術(shù)-細(xì)胞生物學(xué)研究顯微鏡
細(xì)胞培養(yǎng)的無菌技術(shù)
微生物無處不在,它們造成污染的可能性也處處存在。細(xì)胞培
養(yǎng)成功操作最基本的要點(diǎn)是:任何將與細(xì)胞接觸的物品必須是無菌
的或沒有污染的。要解決培養(yǎng)中的污染問題是一件煩瑣的、令人沮
喪的、沒有成功把握的工作,因此,最好的策略就是防止微生物污
染的發(fā)生。
無菌技術(shù)
無菌技術(shù)在理論上是很簡單的:阻止無菌的、未被污染的物質(zhì)
或物品與任何有菌的、被污染的物體相接觸。成功的無菌技術(shù)的一
個(gè)基本因素就是個(gè)人衛(wèi)生。任何直接或間接地與培養(yǎng)相接觸的物品
必須無菌。理想化的情況是所有無菌操作都應(yīng)該在一個(gè)層流式超凈
臺(tái)中進(jìn)行。如果是在一個(gè)敞開的空間進(jìn)行無菌操作,火焰滅菌則通
常是一種直接的、局部的滅菌方法。由于火焰形成的湍流會(huì)極大地
打亂無菌氣流,因此火焰滅菌法應(yīng)盡量少用。
細(xì)胞運(yùn)輸?shù)臏?zhǔn)備
當(dāng)單層貼壁細(xì)胞生長接近匯合狀態(tài)、懸浮細(xì)胞生長到所需濃度
時(shí),用25cm2培養(yǎng)瓶進(jìn)行運(yùn)輸比較容易。首先倒掉瓶中培養(yǎng)液,裝
滿新鮮培養(yǎng)液;懸浮細(xì)胞培養(yǎng)瓶則直接加滿新鮮培養(yǎng)液。裝滿培養(yǎng)
液可防止運(yùn)輸途中由于瓶子翻轉(zhuǎn)而導(dǎo)致細(xì)胞變干。瓶蓋要擰緊并用
膠帶封閉。將培養(yǎng)瓶密封在一個(gè)防漏的塑料袋或其他防漏容器內(nèi),
這樣可預(yù)防瓶子損壞后液體滲漏。再將這個(gè)一級容器放入二級隔離
容器內(nèi),可避免運(yùn)輸途中溫度急劇變化。外包裝盒上還應(yīng)粘貼生物
危險(xiǎn)品標(biāo)簽。一般地,培養(yǎng)物應(yīng)在當(dāng)天或過夜就到達(dá)目的地。
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