整體封藏與切片
新鮮的或固定的微小樣品,可以不經(jīng)切片直接鏡檢,例如花粉母細(xì)
胞、花粉、精細(xì)胞、用特殊方法人工分離出來(lái)的胚囊、卵細(xì)胞、合子等
,只有一層或少數(shù)幾層細(xì)胞的厚度,光線可以穿透,將它們整體封藏(w
hole mount)后光鏡檢查很方便。甚至含有多層細(xì)胞的組織,有時(shí)也可
整體觀察。例如,蘭科植物的胚珠十分微小(順便說(shuō)一下,蘭科屬于微
子目),常常僅有一層珠被細(xì)胞,缺乏珠心組織,可以直接在顯微鏡下
看到內(nèi)部的胚囊和幼胚。大的胚珠,有數(shù)十層外圍組織覆蓋內(nèi)部的胚囊
,需要經(jīng)透明劑(例如水楊酸甲酯,俗稱冬青油)處理后,才能透視內(nèi)部
結(jié)構(gòu)。整體材料的觀察方法有其優(yōu)點(diǎn),除制作快捷外,更重要的一點(diǎn)是
能顯示器官內(nèi)各個(gè)細(xì)胞的三維空間關(guān)系,使人一目了然地獲得自然的立
體圖像。
但是,在大多數(shù)情況下整體封藏的材料畢竟難以洞察內(nèi)部細(xì)胞的狀
態(tài),這就需要將材料切成薄片才能觀察。談到切片技術(shù)的發(fā)展,最先可
以追溯到徒手切片(free—hand section)。用支持物(如胡蘿卜根)夾持
新鮮的或固定的材料,以鋒利的刀片作重復(fù)的切削動(dòng)作,可以從大量的
切片中挑選出比較平整而薄的切片進(jìn)行觀察。可以想象,初期的胚胎學(xué)
研究就是用這種簡(jiǎn)單、原始的技術(shù)取得了許多重大發(fā)現(xiàn)。甚至直到20世
紀(jì)50年代,個(gè)別研究者還在使用徒手切片,觀察小麥子房的胚囊,看到
其中有生活原生質(zhì)的運(yùn)動(dòng)。后來(lái),在徒手切片的基礎(chǔ)上,發(fā)明了各種切
片機(jī)(microtome),可以控制切片的厚度,并且能獲得更薄的、均勻一
致的切片。有一種切片機(jī)稱為“滑走切片機(jī)”,多用于為較粗硬的材料
制作切片,成為木材解剖學(xué)中常用的技術(shù)。還有較遲發(fā)明的“振動(dòng)切片
機(jī)”,可用來(lái)制作較厚的新鮮切片。但這些切片技術(shù)在植物胚胎學(xué)中應(yīng)
用不廣。應(yīng)用最廣而流傳最久的切片技術(shù)是石蠟切片(paraffin sectio
n)。
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