格哈特的解決方案
? ? ? ? ? ? ——凱氏定氮測不了的幾種氮
Kjeldahl Nitrogen Method凱氏定氮法
是公認(rèn)的作為(粗)蛋白質(zhì)含量的最終仲裁方法,是因為我們?nèi)祟?00多年來已經(jīng)認(rèn)定蛋白質(zhì)含量就是用凱氏定氮法并用凱氏因子計算處理的結(jié)果,還由于凱氏定氮對某些生物物質(zhì)(可能包含外來物質(zhì))中一些“氮(Nitrogen)”是沒有包含的,這是我們做品質(zhì)分析時應(yīng)該了解的情況,也就是如果使用杜氏定氮(Dumas Nitrogen Method)法時必須清楚的,因為杜氏定氮會把所有的氮全都測定出來,在某些情況就可能出現(xiàn)結(jié)果略高于凱氮法,我們做氮的分析時都必須十分清楚的。
凱氏定氮法對下面的這些氮可能測定不了,但不排除有部分測定,而這些物質(zhì)基本都不是蛋白質(zhì)的組成,一般僅在含量很高時會給杜氮產(chǎn)生干擾:
硝氮(硝基化合物)Nitrate/ Nitrite/Nitro/ Nitroso
重氮Diazo
疊氮Azide
偶氮Azo
雜環(huán)氮Azacycle
硝氮
就是氧化態(tài)的氮(N-O),通常是硝態(tài)氮(Nitrate),即硝酸根(NO3-)中所含有的氮。也涉及到:亞硝態(tài)氮(Nitrite),即亞硝酸根(NO2-)中的氮;硝基(Nitro)氮,是硝基化合物即硝基(-NO2)與其他基團相連的化合物中的氮;亞硝基(Nitroso)氮,是亞硝基化合物即亞硝基(-NO)與其他基團相連的化合物中的氮。因為凱氏定氮是用硫酸來把樣品中的氨態(tài)氮(N-H)轉(zhuǎn)化成為硫酸銨來分析氮的,硝氮的鍵合力大于硫酸的氧化力,如硫酸不能消化硝酸,所以凱氏消化的結(jié)果,硝氮會氣化跑掉。如果要用凱氏定氮法測定硝態(tài)氮,要先把硝態(tài)氮還原成為氨態(tài)氮,就是這個道理。
重氮化合物(Diazo)
是一類由烷基與重氮基相連接而生成的有機化合物,是兩個氮原子相互連接組成的二價原子團,結(jié)構(gòu)式為-N=N-或N≡N=。也包括其它重氮鹽(-N+≡N)。兩個氮的鍵合力比較穩(wěn)定,不容易被硫酸所分解。
疊氮化合物(Azide)
是一類由疊氮基即含有三個氮相連結(jié)構(gòu)的化合物,一般用RN3表示??上攵?,其鍵合力更強。
偶氮化合物(Azo)
是偶氮基兩端連接烴基的一類有機化合物,是重氮鹽偶聯(lián)的化合物,有單偶氮、雙偶氮、三偶氮和多偶氮,有順反異構(gòu)。其結(jié)構(gòu)可能比重氮還穩(wěn)定,但有可能發(fā)生分解,但不太能分解成氨態(tài)氮。
雜環(huán)氮(Azacycle)
是在雜環(huán)化合物(Heterocyclic compounds)即分子中含雜環(huán)(非碳)的有機物的雜環(huán)中的氮。氮雜環(huán)時雜環(huán)化合物中最多的,這個氮也是難以轉(zhuǎn)變成氨態(tài)氮的。
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