FAIMS Pro

相信很多老師對于賽默飛的FAIMS Pro(High-field asymmetric waveform ion mobility spectrometry，高場非對稱波形離子遷移譜)接口已經(jīng)非常熟悉和了解了。FAIMS Pro（圖一）是一種在大氣壓條件下分離離子的技術(shù)，安裝在大氣壓離子源與MS真空腔的入口之間，通過電極上的補償電壓除去蛋白質(zhì)組學(xué)樣品中一價離子對檢測帶來的干擾，降低背景噪音，從而擴(kuò)大蛋白鑒定的深度。

圖1 Exploris 480 質(zhì)譜儀 配置FAIMS Pro 和Easy nLC 1200（點擊查看大圖）

FAIMS Pro接口一經(jīng)推出，就收到了廣泛好評。從 2018 年下半年發(fā)布以來，已發(fā)表了?47?篇同行評議的文章，覆蓋?19?個不同的研究應(yīng)用領(lǐng)域，包括肽段、蛋白和蛋白復(fù)合物分析，集中在發(fā)現(xiàn)/表征和非標(biāo)定量（LFQ）及標(biāo)記定量（TMT）等相關(guān)的應(yīng)用（圖二）。

圖2 FAIMS Pro 發(fā)表文章匯總

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今天我們要隆重介紹的是全新一代的FAIMS接口，F(xiàn)AIMS Pro Duo。那么接下來讓我們看看FAIMS Pro Duo都有哪些新表現(xiàn)。

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增強(qiáng)選擇性，超高靈活性

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為了滿足分析各個實驗室與日俱增的對復(fù)雜樣品，不同種類化合物的定性和定量需求，F(xiàn)AIMS Pro Duo在保留前一代對多肽蛋白類化合物分析性能的基礎(chǔ)上增加了對于小分子化合物的分析定量能力，使FAIMS Pro Duo的應(yīng)用場景不單局限于蛋白質(zhì)組學(xué)樣品分析，更可以應(yīng)用到常規(guī)定量分析。

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FAIMS Pro Duo相比較于前一代FAIMS Pro 保留了之前所有的低流速性能，并擴(kuò)展支持高流速應(yīng)用，Z ui大適用流速達(dá)到了1mL/min。其采用優(yōu)化的的圓柱形幾何形狀，大大增加了離子傳輸?shù)劫|(zhì)譜儀的概率，縮短了停留時間，同時允許每個數(shù)據(jù)采集方法進(jìn)行多個?CV 設(shè)置。拆裝速度快，不需要破壞真空，組裝僅需兩分鐘，單向wan美對齊，無需微調(diào)，不需要使用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校正（圖三）。

圖3 FAIMS Pro Duo 內(nèi)部結(jié)構(gòu)

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升級之后的FAIMS Pro Duo不僅可以搭載在蛋白質(zhì)組學(xué)常用的質(zhì)譜平臺Exploris240，480，三合一質(zhì)譜Eclipse以及Fusion Lumos上。FAIMS Pro Duo也可以搭載到Exploris 120，以及三重四極桿平臺TSQ Altis和Quantis上，更方便于常規(guī)流速下的定量分析（圖四）。

圖4 FAIMS Pro Duo 可適用的應(yīng)用及LC-MS系統(tǒng)

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CV優(yōu)化，降低噪音，助力靶向定量

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由于不同的價態(tài)或者分子量的化合物其Z ui優(yōu)條件下的CV都各有差異。所以針對于定量實驗，F(xiàn)AIMS Pro Duo 增加了CV優(yōu)化的功能。不管是使用直接進(jìn)樣或者是在線的色譜分離方法都可以直接對一種或者多種化合物進(jìn)行調(diào)諧和CV優(yōu)化（圖五），大大簡化了FAIMS Pro Duo接口與 Thermo Scientific質(zhì)譜儀的設(shè)置和使用，縮短方法開發(fā)的時間。

圖5 色譜分離的方法優(yōu)化CV值

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FAIMS Pro Duo去除基質(zhì)干擾的能力在化合物定量下限濃度附近表現(xiàn)更為明顯（圖六）。當(dāng)化合物濃度接近定量限時，如果目標(biāo)化合物出峰附近有基質(zhì)干擾峰，這時基質(zhì)干擾峰會影響目標(biāo)化合物的檢測，出現(xiàn)色譜峰信噪比低，積峰困難等情況。我們可以通過使用FAIMS Pro Duo的自動CV優(yōu)化功能，對目標(biāo)化合物的CV電壓進(jìn)行優(yōu)化，用FAIMS Pro Duo去除掉部分的雜質(zhì)離子，從而提升目標(biāo)化合物的信噪比，進(jìn)一步降低定量LOQ。

圖6 FAIMS Pro Duo可以增加LOQ的信噪比，降低定量下限（點擊查看大圖）

以上就是FAIMS Pro Duo的新特性，它在保留了前一代FAIMS Pro在蛋白質(zhì)組學(xué)里去除雜質(zhì)干擾，擴(kuò)大蛋白鑒定深度上的良好表現(xiàn)，進(jìn)一步增加了它在定量分析上的適用性。最重要的是它還支持從FAIMS Pro的現(xiàn)場升級，感興趣的老師快來聯(lián)系我們吧！

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