細(xì)胞裂解之溶質(zhì)濃度細(xì)胞壁檢測(cè)生物顯微鏡

  滲透裂解
  細(xì)胞內(nèi)的溶質(zhì)濃度和膜壓力一般來(lái)說(shuō)是高于外界的，當(dāng)外界濃
度小于細(xì)胞內(nèi)時(shí)，濃度梯度會(huì)使水流入細(xì)胞，反之亦然。只有水才
能通過(guò)膜，如果沒(méi)有支撐，細(xì)胞會(huì)因此靜水壓力引起的滲透震擾腫
脹并破裂。
  大多數(shù)的微生物都不能直接被滲透震擾作用，除非細(xì)胞壁提前
經(jīng)過(guò)酶作用或者在培養(yǎng)時(shí)抑制了細(xì)胞壁的合成。使用稀釋的緩沖液
或蒸餾水快速稀釋(10～20倍)可以有效地裂解原生質(zhì)球和原生質(zhì)體
，所產(chǎn)生的囊泡的大小取決于稀釋的速度和程度。本方法通常將樣
品離心后得到原生質(zhì)體或原生質(zhì)球，再加入裂解液中進(jìn)行裂解凍融
法
  凍融法可以提高革蘭氏陰性細(xì)胞對(duì)溶菌酶和表面活性劑的敏感
度，可用于對(duì)大批量膜或者亞細(xì)胞細(xì)胞器的分離中。
  表面活性劑在細(xì)胞裂解中的應(yīng)用
  表面活性劑是一種既有親水性又有憎水性的兩性分子，在革蘭
氏陽(yáng)性菌肽聚糖的完整性或革蘭氏陰性菌外層膜被破壞的情況下，
能夠提供較溫和的裂解方式。表面活性劑在選擇性溶解細(xì)胞質(zhì)膜(
脂雙層)的同時(shí)，可以保持外層膜的完整性，細(xì)胞便隨之破壞：表
面活性劑還可以用于除去核糖體、多聚核糖體和革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞
壁中的膜污染：表面活性劑可使蛋白質(zhì)變性，由于染色體和質(zhì)粒DN
A對(duì)機(jī)械方法中產(chǎn)生的流致壓力很敏感，因此表面活性劑法也是最
普遍使用的細(xì)胞裂解方法之一

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