實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)與顯微分光光度計(jì)-光學(xué)儀器
顯微分光光度計(jì):它用一種很窄的單色輻射束與顯微鏡系統(tǒng)相
聯(lián)。這種儀器能測(cè)定單個(gè)活細(xì)胞內(nèi)不同部位的消光。
應(yīng)用
大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)的最一般的用途是作為優(yōu)質(zhì)比色計(jì),
即作為光度計(jì)用以測(cè)量在顏色反應(yīng)中產(chǎn)生的生色團(tuán)的量。后面即將
介紹這項(xiàng)技術(shù)以及分光光度法比較經(jīng)典的用法。
比色測(cè)定法:許多物質(zhì)在可見光區(qū)的消光系數(shù)微不足道,它可
以與某些別的試劑定量地反應(yīng)而生成有色產(chǎn)物。這種性質(zhì)可以作為
分析這些物質(zhì)的基礎(chǔ)。顏色是在標(biāo)準(zhǔn)條件下從這種物質(zhì)的已知量產(chǎn)
生的(生色團(tuán)),并且測(cè)定這些樣品的消光,用含有除被測(cè)物質(zhì)以外
的全部試劑的參考杯作為試劑空自。用這個(gè)空白通過變化狹縫寬度
使消光讀數(shù)至零。測(cè)量的消光對(duì)應(yīng)產(chǎn)生顏色的測(cè)試物質(zhì)的量或濃度
制圖。這個(gè)圖譜叫做校準(zhǔn)曲線。然后物質(zhì)的未知量可以通過在同樣
標(biāo)準(zhǔn)條件下產(chǎn)生的顏色,測(cè)量其消光并用校準(zhǔn)曲線來決定產(chǎn)生該消
光的物質(zhì)的量來測(cè)定。因?yàn)橛帽容^少量的物質(zhì)常常能夠產(chǎn)生比較高
的消光,所以比色測(cè)定法普遍應(yīng)用于生物化學(xué),來分析廣泛范圍的
生物學(xué)重要分子。
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