鑒定與確認(rèn)

對(duì)于通過富集或直接涂布于低pH培養(yǎng)基上而形成的菌落必須用合適
的分析技術(shù)來確認(rèn)其是否為脂環(huán)酸芽孢桿菌。采用何種合適分析技術(shù)是
主要的爭(zhēng)論點(diǎn)。對(duì)于確定所分離的菌種是酵母還是其他脂環(huán)酸芽孢桿菌
，以及對(duì)于確定該分離菌是否為革蘭陽(yáng)性芽孢菌，進(jìn)行鏡檢是必需的。
分離菌落是否產(chǎn)芽孢可能要進(jìn)一步在其他培養(yǎng)基上涂布培養(yǎng)后，再進(jìn)行
芽孢染色，然后鏡檢來進(jìn)行確定。

起確認(rèn)作用的菌種生長(zhǎng)特性包括：在較高溫度(45～55℃)下能在低
pH培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，同時(shí)不能在中性pH培養(yǎng)基如常規(guī)平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基
或未酸化基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，也不能在低溫下生長(zhǎng)。還有一種可行實(shí)驗(yàn)
方案是將可疑菌落分別劃線于低pH和中性pH兩組平板上，然后將一組平
板置于45—50℃下培養(yǎng)，將另一組平板置于20—25℃下培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間。
如果在低pH瓊脂培養(yǎng)基中在45℃下能生長(zhǎng)，在25't2時(shí)在低pH瓊脂培養(yǎng)
基上少量或不生長(zhǎng)，同時(shí)在其他平板上任意溫度下均不能生長(zhǎng)，那么該
菌可能是脂環(huán)酸芽孢桿菌。最終確認(rèn)還需進(jìn)一步的檢測(cè)。

樣品經(jīng)稀釋后進(jìn)行熱休克處理并在40～55℃下培養(yǎng)3～7d，如不能
迅速進(jìn)行熱休克處理或處理不充分應(yīng)加入某種酵母／霉菌抑制劑。培養(yǎng)
結(jié)束時(shí)，將樣品在合適培養(yǎng)基上劃線并在無(wú)氧條件45～50℃下培養(yǎng)數(shù)天
。若有菌落形成可說明可能有脂環(huán)酸芽孢桿菌存在，盡管還需進(jìn)一步分
析來進(jìn)行確認(rèn)。

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