光學(xué)顯微鏡細(xì)胞形態(tài)的圖像質(zhì)量定量分析實(shí)驗(yàn)

  組織切片制作方法
  組織切片制作方法與非切片制作方法的最大區(qū)別是利用切片機(jī)
制作出相應(yīng)的標(biāo)本切片。制作的切片包括：石蠟切片、火棉膠切片
、冰凍切片、樹脂切片、碳蠟切片、電鏡超薄切片等。
  切片類型的確定主要是依據(jù)標(biāo)本內(nèi)支持物的種類，如石蠟切片
，其標(biāo)本內(nèi)的支持物為石蠟，石蠟填充于標(biāo)本內(nèi)的各個(gè)空間。因此
，石蠟切片實(shí)際上就是切帶有標(biāo)本材料的石蠟，因?yàn)闃?biāo)本與石蠟已
經(jīng)融為了一個(gè)整體。同理，冰凍切片的支持物是冰，電鏡超薄切片
的支持物就是環(huán)氧樹脂。目前，最常用的切片種類是石蠟切片、冰
凍切片、樹脂切片、電鏡超薄切片。

石蠟切片制作過(guò)程總體上可概括為9個(gè)步驟：取材、固定、脫水、
透明、浸蠟、包埋、切片、染色、封固。制作過(guò)程中的每個(gè)環(huán)節(jié)都
是相互關(guān)聯(lián)的，一個(gè)環(huán)節(jié)出了差錯(cuò)，必將會(huì)對(duì)后續(xù)環(huán)節(jié)的操作產(chǎn)生
負(fù)面影響，并有可能最終導(dǎo)致光鏡下組織或細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察的偏
差或失敗。
  取材是指從人體或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物體內(nèi)取下所需觀察的組織材料的過(guò)
程。
  標(biāo)本主要來(lái)源于臨床活體檢查、臨床手術(shù)切除、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型
以及病理解剖等途徑。取材的標(biāo)本要求均為新鮮組織。離體或機(jī)體
死亡大于兩小時(shí)以上的標(biāo)本材料，其內(nèi)部可能會(huì)出現(xiàn)不同程度的自
溶，嚴(yán)重者甚至?xí)霈F(xiàn)細(xì)胞的彌散與溶解現(xiàn)象。因此，標(biāo)本的取材
是標(biāo)本樣品制備過(guò)程的第一步，取材是否科學(xué)、是否符合實(shí)驗(yàn)要求
，將直接關(guān)系到光鏡下組織細(xì)胞形態(tài)的觀察質(zhì)量。
  做好標(biāo)本取材前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是保障取材過(guò)程順利進(jìn)行的前
提。取材過(guò)程中所使用的各種器械(解剖剪、手術(shù)刀片等)是否鋒利
，固定劑的配制與固定容器的選擇是否恰當(dāng)，以及其他輔助性的取
材用具(卡片紙、軟木片等)的準(zhǔn)備是否充分等，都會(huì)直接影響標(biāo)本
取材的過(guò)程。另外，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死方法的選用要恰當(dāng)，避免動(dòng)物瀕
臨死亡前的過(guò)度掙扎，否則會(huì)引起機(jī)體內(nèi)缺氧時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而導(dǎo)致組織
或細(xì)胞結(jié)構(gòu)的失常。
  總之，無(wú)論怎樣實(shí)施標(biāo)本取材的操作過(guò)程，其最終的要求就是
整個(gè)取材的過(guò)程應(yīng)迅速、準(zhǔn)確。

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