大多數(shù)土壤中都可以找到鏈霉菌噬菌體
大多數(shù)土壤中都可以找到鏈霉菌噬菌體。這些噬菌體可利用
常規(guī)的雙層平板技術(shù),通過將土壤浸提物直接涂布到含有指示菌
平板上加以分離3也可在液體培養(yǎng)基中先用土壤浸提物侵染指示菌
,使噬菌體得到增殖,然后再涂平板分離。直接涂平板時(shí),平板
中形成的每個(gè)噬菌斑代表土壤樣品中一個(gè)噬菌體粒子。有些噬菌
斑經(jīng)過特殊增殖以后才可檢測(cè)到,甚至有些土壤樣品經(jīng)直接涂布
不能出現(xiàn)的噬菌斑也可經(jīng)增殖后檢測(cè)到。
鏈霉菌菌株和噬菌體的貯存
短期使用的菌株可以瓊脂培養(yǎng)物的方式(斜面或密封的培養(yǎng)m1
)在4℃保存。如果產(chǎn)生孢子后再冷藏的話,培養(yǎng)物可存活很久(好
幾個(gè)月)。未產(chǎn)生孢子的培養(yǎng)物需要經(jīng)常轉(zhuǎn)接。
長期保存菌種最方便的方法是用20%的甘油制備孢子懸液,
于一20℃保存.取樣時(shí)即使反復(fù)解凍和再凍,只要孢子再次冷凍
前不放在室溫下太久,活力幾乎也不會(huì)下降。如果要長期貯存,
以作為冷凍孢子懸液的后備貯存物,通常按下法(Hopwood和Ferg~
son,1969)制備真空干燥樣品(于濾紙芯上)。
噬菌體通常用DNB制成懸液,置于4℃下避光保存。噬菌體的
真空干燥樣品可用濾紙芯蘸懸液后按處理孢子的同樣方法制淆。
真空干燥樣品的制備
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