RNAi (RNAinterference, RNA干擾)技術(shù),是將與內(nèi)源 mRNA 編碼區(qū)同源的小片段(19 -23bp)外源雙鏈 RNA(siRNA)導(dǎo)入細(xì)胞中,引發(fā)細(xì)胞中相應(yīng) mRNA 的降解,從而導(dǎo)致特定基因表達(dá)沉(knock down)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于研究基因功能,并且越來越成為一種標(biāo)準(zhǔn)化的技術(shù)工具。
RNAi實(shí)驗(yàn)方法:
上海閎巨實(shí)業(yè)有限公司采用質(zhì)粒系統(tǒng)進(jìn)行RNAi技術(shù),對(duì)于轉(zhuǎn)染困難的細(xì)胞或者需要長時(shí)間沉默的實(shí)驗(yàn),我公司可以提供病毒包裝轉(zhuǎn)染服務(wù),價(jià)格高于普通轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染。
實(shí)驗(yàn)主要步驟:
1.根據(jù)基因設(shè)計(jì)相關(guān)RNAi引物對(duì)
2.將合成的互補(bǔ)引物退火
3.線性化載體(用內(nèi)切酶BglII和HindIII;或BglII和XhoI)
4.挑選陽性克隆
5.細(xì)胞轉(zhuǎn)染
6.沉默效果鑒定
服務(wù)須知:
由客戶提供基因或序列,技術(shù)服務(wù)完成后向客戶提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告、測(cè)序單、質(zhì)粒以及Western(或Realtime-PCR)鑒定結(jié)果圖片。對(duì)于病毒轉(zhuǎn)染,還將提供包裝好的病毒顆粒
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