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短螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)-91化工儀器網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-03  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):588
核心提示:上海研生生化試劑有限公司是一家專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)生化試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)室耗材的公司, 代理許多平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。我們努力將歐美專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)廠家的具水平的產(chǎn)品推薦給各類(lèi)研究人員;另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開(kāi)發(fā),推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。公司客戶(hù)遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù) 在同行獲得一致好評(píng)。其立足于生命科

上海研生生化試劑有限公司是一家專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)生化試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)室耗材的公司, 代理許多平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。我們努力將歐美專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)廠家的具水平的產(chǎn)品推薦給各類(lèi)研究人員;另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開(kāi)發(fā),推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了極大的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。
公司客戶(hù)遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù) 在同行獲得一致好評(píng)。其立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn),同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴(lài)的伙伴。
公司的理念是:以誠(chéng)信為本,努力打造優(yōu)質(zhì)品牌,為您提供全方位的售中、售后服務(wù)。
公司主推品牌: (進(jìn)口、國(guó)產(chǎn))
Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R D、Linco、Amersham、Millipore、Costar 等


短螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)技術(shù)原理:
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
 發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
普通PCR反應(yīng)流程: 
?
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 L、20
L、200 L、1000 L)。
2.耗材:熒光 PCR 專(zhuān)用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 L、200 L、1000 L)、滅菌雙蒸水。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A)                                   毫升
染色液(t B)                                   微升
稀釋液(C)                                   毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份拉

產(chǎn)品名稱(chēng)

短螺旋體通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

英文名稱(chēng)

Brachyspira spp.PCR

編號(hào)

HE30747-R

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3 端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3 端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
phospho-Claudin 6(Tyr219)英文名稱(chēng):beta Defensin 1人血紅蛋白C(HbC)免疫試盒

CENPT英文名稱(chēng):BAFFR人血紅蛋白(Hb)免疫試盒

CAPD2英文名稱(chēng):BAFF人血管抑/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)免疫試盒

CENPP英文名稱(chēng):Batroxobin人血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13/vWF-cp)免疫試盒

CDCA5英文名稱(chēng):Brn-2人血管舒緩激肽(BK)免疫試盒

CAPG2英文名稱(chēng):CD274人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試盒

CDC10英文名稱(chēng):B7H4人血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試盒

CEP97英文名稱(chēng):BACE1人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試盒英文名稱(chēng)兔子可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA Kit,48T/96T 200mg

英文名稱(chēng)人Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 200mg

英文名稱(chēng)白藜蘆苷小鼠Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 1g

英文名稱(chēng)豬Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 150mg

英文名稱(chēng)芍;牡丹大鼠Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 25mg

英文名稱(chēng)丹參A兔子Ⅰ型前膠原羧端肽(PⅠCP)ELISA Kit,48T/96T 200mg

英文名稱(chēng)丹參B人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T 75mg

英文名稱(chēng)小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA Kit,48T/96T 75mg

 

 
 
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