elisa試劑盒原理:
人血清總補體(CH50)ELISA檢測試劑盒操作步驟
采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人MART/Melan-A抗體包被于酶標板上,實驗時樣品或標準品中的MART/Melan-A與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人MART/Melan-A抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗人MART/Melan-A抗體與結(jié)合在包被抗體上的人MART/Melan-A結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色,加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值,MART/Melan-A濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標準曲線計算出樣品中MART/Melan-A的濃度。
應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)
研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病、其他研究。
其他產(chǎn)品種屬:人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 兔ELISA試劑盒 倉鼠ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 魚ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒 馬ELISA試劑盒 豬ELISA試劑盒犬ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 昆蟲ELISA試劑盒 植物ELISA試劑盒
ELISA實驗標本的采集、處理和保存
能夠應(yīng)用ELISA 實驗的樣本種類很多,有血清,血漿,細胞上清,細胞裂解液,尿液,關(guān)節(jié)滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種組織的組織勻漿;采集和處理的方式都不相同。下面就列出了 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻和試劑盒說明書,部分方法驗證過,但有的方法并沒有實際操作過,所以,以下方法僅供參考。
一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;
2、 采血后室溫靜置1小時;
3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的 ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細菌污染,因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標本宜在新鮮 時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
二、ELISA實驗中血漿的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;
2、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集);
3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心5min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。 請注意指標說明書上對于抗凝血劑是否有特殊要求,建議使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。
注意事項:制備血漿標本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。
三、ELISA 實驗中尿液的采集、處理和保存;
1、 采集尿液樣本500ul,加入無菌試管中;
2、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。
3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
4、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
四、ELISA 實驗中腦脊液的采集、處理和保存;
1、采集腦脊液樣本,加入無菌試管中;
2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。
3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
4、根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
五、ELISA 實驗中細胞上清液的采集、處理和保存;
1、采集細胞培養(yǎng)上清液500ul,加入無菌試管中;
2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
4、根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。